[发明专利]枯草芽孢杆菌发酵紫花苜蓿叶得水溶性膳食纤维的方法

说明书

本发明公开了一种枯草芽孢杆菌发酵紫花苜蓿叶得水溶性膳食纤维的方法，包括以下步骤：制备孢子浓度为10⁷～10⁸CFU/ml的枯草芽孢杆菌培养液；将苜蓿草叶粉按照1g/29～31ml的料液比加入至营养液中密封后灭菌，得苜蓿草液；于无菌条件下，将枯草芽孢杆菌培养液接入至苜蓿草液，摇床中发酵培养；发酵液灭菌后离心；离心所得的上清液抽滤，所得的滤液加入无水乙醇后静置、离心，所得的沉淀冷冻干燥，得苜蓿水溶性膳食纤维。本发明操作简单，所用时间短；提取率高。

技术领域

本发明属于食品领域，具体涉及枯草芽孢杆菌发酵紫花苜蓿叶得水溶性膳食纤维的方法。

背景技术

常见的水溶性膳食纤维主要有：菊粉、葡聚糖、抗性淀粉、壳聚糖、燕麦β-葡聚糖、瓜尔胶、藻酸钠、真菌多糖等，常见的食物中的大麦、豆类、胡萝卜、柑橘、亚麻、燕麦和燕麦糠等食物都含有丰富的水溶性纤维。相比而言，水溶性膳食纤维因其具有良好的加工性能和更优的生理功能，近年来在食品加工中作为增稠剂、膨胀剂、配方助剂和填充剂，广泛的应用于低能量食品和功能性食品的生产开发，水性膳食纤维的相关食品有着巨大的发展空间，市场前景广阔。

紫花苜蓿(学名：Medicago sativa.)豆科、苜蓿属多年生草本，根粗壮，深入土层，根颈发达。茎直立、丛生以至平卧，四棱形，无毛或微被柔毛，枝叶茂盛。种子卵形，长1-2.5毫米，平滑，黄色或棕色。花期5-7月，果期6-8月。原产于小亚细亚、伊朗、外高加索一带。世界各地都有栽培或呈半野生状态。生于田边、路旁、旷野、草原、河岸及沟谷等地。欧亚大陆和世界各国广泛种植为饲料与牧草。

201410010589.3的发明《一种紫花苜蓿膳食纤维的提取方法》提供了一种采用淀粉酶和蛋白酶酶法结合化学试剂和超声波结合水解提取膳食纤维的工艺技术，提供一种以营养期紫花苜蓿为原料提取膳食纤维的方法，可提高紫花苜蓿膳食纤维成品中可溶性膳食纤维的含量。该方法可以提取到IDF(水不溶性膳食纤维)和SDF(水溶性膳食纤维)两种膳食纤维。膳食纤维含量占提取物的92％，其中水溶性膳食纤维SDF为7％，水不容性膳食纤维IDF为85％；膳食纤维的含量GB/T5009.88--2008规定的方法检测得到；该方法包括以下步骤：

⑴将苜蓿去除杂质、清洗、干燥，粉碎，用清水泡洗过滤后晒干得苜蓿干粉；

⑵加入乙酸乙酯浸泡脱脂，脱脂后用去离子水充分清洗；

⑶调节pH值至弱碱性，加入蛋白酶进行去蛋白操作，过滤取上清液；

⑷调节所述步骤⑶得到的上清液的pH值，加入淀粉酶进行酶解，再以超声波辅助提取，再次过滤取上清液；

⑸所述步骤⑷得到的上清液用过氧化氢进行脱色；

⑹121℃高温加压处理30min并离心，离心得到的沉淀物和上清液分别用体积浓度为95％的乙醇洗涤，加碱蒸煮10～30min，用去离子水洗净碱后抽滤压干。

该方法的水溶性膳食纤维提取率低，仅仅约为7％。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种提取率高的枯草芽孢杆菌发酵紫花苜蓿叶得水溶性膳食纤维的方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种枯草芽孢杆菌发酵紫花苜蓿叶得水溶性膳食纤维的方法，包括以下步骤：

1)、制备孢子浓度为10⁷～10⁸CFU/ml的枯草芽孢杆菌培养液；

2)、配制营养液：

100ml营养液由(2.3±0.1)g Na₂HPO₄、(0.4±0.04)g无水柠檬酸和作用余量的水组成；

营养液的pH约为7；