[发明专利]替诺福韦艾拉酚胺系列杂质及其合成方法

权利要求书

1.替诺福韦艾拉酚胺杂质，其特征在于，包括以下结构式的化合物中的至少一种：

2.权利要求1中杂质C的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

将替诺福韦单苯酯与二氯亚砜、溶剂混合反应，反应结束浓缩反应液，然后加入二氯甲烷溶解，与L-丙氨酰-L-丙氨酸异丙酯的二氯甲烷溶液混合，混合过程中采用三乙胺保持pH为6-8，继续反应得化合物C。

3.根据权利要求2所述杂质C的合成方法，其特征在于，替诺福韦单苯酯与二氯亚砜反应步骤的反应温度为50～80℃，滴加步骤控制温度为-20～10℃。

4.根据权利要求2或3所述杂质C的合成方法，其特征在于，替诺福韦单苯酯：二氯亚砜：L-丙氨酰-L-丙氨酸异丙酯的摩尔比为1：(1.0～4.0)：(0.2～1.0)，进一步为1：2.0：0.6；所述溶剂为乙腈。

5.根据权利要求3所述杂质C的合成方法，其特征在于，替诺福韦单苯酯与二氯亚砜反应步骤的反应温度70-80℃，反应时间为2-6小时，优选为3～4小时；所述滴加步骤控制温度为-15～10℃，优选为0～10℃，反应时间为2～3小时。

6.权利要求1中杂质E的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

将替诺福韦单苯酯与乙醛、乙酸混合，升温到30～45℃进行反应，然后加入10％钯碳还原得到杂质E。

7.根据权利要求6所述杂质E的合成方法，其特征在于，替诺福韦单苯酯与乙醛的摩尔比为1：(2.0～30.0)。

8.根据权利要求6或7所述的杂质E的合成方法，其特征在于，所述钯碳还原步骤，反应温度为55～65℃，反应时间为16～20h。

9.权利要求1所述杂质作为替诺福韦艾拉酚胺药物研究对照品的用途。

10.对替诺福韦艾拉酚胺进行杂质检测的方法，其特征在于，所述杂质包括权利要求1所述杂质，包括以下条件：

色谱柱C18色谱柱，进一步选自Waters XBridge Shield RP C18色谱柱；

检测波长：260nm；

柱温：25℃；

流动相A：磷酸盐溶液，用氢氧化钠溶液调节pH值至5-6，优选为0.04mol/L的磷酸二氢钠溶液，用4％氢氧化钠溶液调节pH值至5.0；

流动相B：乙腈

溶剂/稀释液：流动相A与流动相B混合得到的溶液，优选流动相A：流动相B的体积比为8:2；

洗脱梯度：

时间	流动相A(％)	流动相B(％)
0	92-98	2-8
30	70-80	20-30
40	40-50	50-60
45	92-98	2-8

优选洗脱梯度：

时间	流动相A(％)	流动相B(％)
0	98	2
30	78	22
40	45	55
45	98	2

进一步地，还包括以下条件：

进样量：10μl；

流速：1.0ml/min；

数据采集时间：45min；

运行时间：45min；

进一步地，还包括以下步骤：

供试品溶液：取富马酸替诺福韦艾拉酚胺原料适量，精密称定，用前述溶剂溶解，并稀释成每1mL含0.6mg原料的溶液，作为供试品溶液；

成品对照品溶液：取富马酸替诺福韦艾拉酚胺对照品适量，精密称定，用前述溶剂溶解，并稀释成每1mL约含2mg的溶液，作为成品对照品溶液；

杂质对照品溶液：分别取各杂质适量，精密称定，用40％乙腈水溶液(v/v)溶解，并稀释成每1ml约含各杂质30ug的溶液

系统适用性溶液：取成品对照品溶液1mL，加入50uL杂质对照品溶液混匀，作为系统适用性溶液。