[发明专利]一种测定锑相对生物有效性的小鼠模型建立方法

权利要求书

1.一种测定锑相对生物有效性的小鼠模型建立方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)驯化：取小鼠驯化；

(2)锑的浓度梯度溶液和鼠粮的制备：向超纯水或鼠粮中分别加入含锑的化合物，配制锑的浓度梯度溶液和鼠粮；

(3)锑暴露：将配制的含锑的浓度梯度溶液或鼠粮通过灌胃或喂食的方式，暴露给小鼠，每个浓度设置若干只小鼠作为平行，每日暴露，定时定量；

(4)靶器官采集及预处理：暴露过程结束后的第二天，采集小鼠的肝脏、肾脏以及脾脏，将所有靶器官样品冻干，待用；

(5)靶器官样品处理及测定：记录冻干的靶器官重量，消解并测定样品中锑的含量；

(6)剂量-效应曲线拟合：根据各器官中锑的含量，拟合出剂量-效应曲线；

(7)选择生物靶器官：根据剂量效应结果选择肝脏作为研究锑在小鼠体内生物有效性的最佳生物靶器官；

(8)锑的相对生物有效性测定：a.实验组：将含有锑的样品暴露给小鼠；b.对照组：将含已知锑浓度的参照物质暴露给小鼠，每日定时定量暴露，暴露过程结束后，于第二天取两实验组中小鼠的肝脏测定锑的含量，将实验组与对照组的结果对比，得到样品中锑的相对生物有效性。

2.根据权利要求1所述的测定锑相对生物有效性的小鼠模型建立方法，其特征在于：所述步骤(1)中小鼠为体重为18-20g的Balb-c雌性小鼠。

3.根据权利要求1所述的测定锑相对生物有效性的小鼠模型建立方法，其特征在于：所述步骤(1)中的驯化条件是：在光照和黑夜各12±0.5h，温度21±1℃，湿度50±5％的动物房中驯化两周，驯化过程中小鼠自由进食和饮水。

4.根据权利要求1所述的测定锑相对生物有效性的小鼠模型建立方法，其特征在于：所述步骤(2)中采用超声或搅拌方式将锑的浓度梯度溶液和鼠粮混匀。

5.根据权利要求1所述的测定锑相对生物有效性的小鼠模型建立方法，其特征在于：所述步骤(3)中锑的浓度梯度溶液的灌胃方法为：保持小鼠头部和颈部成一直线，用小鼠灌胃注射器移取0.5±0.02mL灌胃溶液，灌给小鼠，每日定时灌胃；鼠粮暴露的方法为：将制成的鼠粮定时喂食给小鼠，每个实验浓度至少设置三只小鼠作为平行。

6.根据权利要求1所述的测定锑相对生物有效性的小鼠模型建立方法，其特征在于：所述步骤(3)中至少连续暴露7天。

7.根据权利要求1所述的测定锑相对生物有效性的小鼠模型建立方法，其特征在于：所述步骤(5)中采用USEPA 3050B消解法，在每个靶器官样品中各加入10mL1∶1HNO₃(HNO₃∶H₂O＝1∶1，v/v)，消解至剩1-2mL时，加入2mL质量分数为30％的过氧化氢，消解近干时用超纯水定容。

8.根据权利要求1所述的测定锑相对生物有效性的小鼠模型建立方法，其特征在于：所述步骤(5)中利用电感耦合等离子体质谱仪测定靶器官样品中锑的浓度。

9.根据权利要求1所述的测定锑相对生物有效性的小鼠模型建立方法，其特征在于：所述步骤(8)中实验组及对照组采用相同的暴露方式。