[发明专利]检测鸡毒支原体TS-11疫苗株的引物对及方法有效
| 申请号： | 201910390950.2 | 申请日： | 2019-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN109971875B | 公开（公告）日： | 2020-09-11 |
| 发明（设计）人： | 李玉燕;李贵阳;郭龙宗;唐志鹏;曲心怡;沈巍;巩新民;祝永华;陈蕾;衣文娟;胡小然;杜培杰;姜春林;张利娜;韩开顺;沈政;王熊 | 申请（专利权）人： | 山东益生种畜禽股份有限公司;青岛英赛特生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/35 |
| 代理公司： | 北京中济纬天专利代理有限公司 11429 | 代理人： | 马国冉 |
| 地址： | 264001 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 支原体 ts 11 疫苗 引物 方法 | ||
1.一种检测鸡毒支原体TS-11疫苗株的引物对，其特征在于，该引物对包括：
上游引物：TGGGGTGAGATTGGTTAGG；
下游引物：CTATATCTTTTCTAGTGTAG。
2.一种检测鸡毒支原体TS-11疫苗株的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：提取待测样品的DNA；
S2：以S1提取到的DNA为模板，以权利要求1中的引物对为引物，进行PCR扩增反应；
S3：PCR扩增反应结束后，对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳；
S4：观察电泳检测图，根据有无特异性扩增产物的目的条带出现来判定待测样品中是否含有鸡毒支原体TS-11疫苗株，在紫外灯下观察电泳检测图并与标准分子量相对照，若待测样品在620bp处出现了明亮的条带，则证明该待测样品中存在鸡毒支原体TS-11疫苗株。
3.根据权利要求2所述的检测鸡毒支原体TS-11疫苗株的方法，其特征在于，在S1中，使用青岛英赛特生物科技有限公司研发的棉拭子DNA提取试剂盒来提取待测样品的DNA。
4.根据权利要求2所述的检测鸡毒支原体TS-11疫苗株的方法，其特征在于，在S2中，PCR扩增反应的反应体系为：2×mix 12.5 μl，ddH2O 7.5μl，上游引物1μl，下游引物1μl，模板3μl。
5.根据权利要求2所述的检测鸡毒支原体TS-11疫苗株的方法，其特征在于，在S2中，PCR扩增反应的反应程序为：95℃变性3min；95℃变性30s，50℃退火30s，72℃延伸1min，循环35次；72℃延伸10min。
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