[发明专利]一种融合蛋白及其用途

说明书

本发明属医药领域，涉及一种新型融合蛋白，所述的融合蛋白通过与动脉粥样硬化斑块中沉积细胞表面的CD47分子结合，阻断其向巨噬细胞传递信号，解除其对巨噬细胞吞噬功能的抑制，促使巨噬细胞吞噬动脉粥样硬化斑块中的沉积细胞，延缓及逆转动脉粥样硬化病程进展。经动脉粥样硬化早期和中晚期模型小鼠动物实验证实，注射该融合蛋白后，实验小鼠主动脉全长、主动脉根部以及主动脉弓处的斑块面积显著下降。该融合蛋白能用于延缓及逆转动脉粥样硬化模型动物病程进展，以及减少其相关急性心血管事件发生，进一步制备临床治疗动脉粥样硬化的新药物。

技术领域

本发明属医药领域，涉及一种新型融合蛋白，本发明的融合蛋白通过与动脉粥样硬化斑块中沉积细胞表面的CD47分子结合，阻断其向巨噬细胞传递信号，解除其对巨噬细胞吞噬功能的抑制，促使巨噬细胞吞噬动脉粥样硬化斑块中的沉积细胞，延缓及逆转动脉粥样硬化病程进展。进一步用于制备临床治疗动脉粥样硬化的新药物。

背景技术

现有技术公开了动脉粥样硬化是最常见心血管疾病之一，同时也是导致急性心血管事件发生及导致死亡的病理基础。动脉粥样硬化的病理学表现是内皮下脂质沉积，引起巨噬细胞因吞噬脂质形成泡沫细胞，形成粥样斑块^[1]。冠状动脉粥样硬化的形成会导致管腔狭窄，远端血管堵塞，引起相关的急性心血管事件如急性心肌梗死、不稳定心绞痛等的发生，从而严重威胁到患者的生命^[2]。

研究显示，动脉粥样硬化的形成分为四个阶段^[3]：首先是脂纹期，动脉血管内皮细胞受到各种有害刺激(高血压、高血糖、高血脂、氧化应激等)时被激活，内皮通透性增加，氧化修饰的低密度脂蛋白(ox-LDL)在内皮下集聚，同时内皮细胞分泌粘附分子如ICAM-1等，促进单核细胞粘附，巨噬细胞通过表面的清道夫受体结合摄取ox-LDL，形成泡沫细胞，大量泡沫细胞聚集形成脂纹，内皮隆起变形；其次是纤维形成期，内皮细胞分泌的细胞因子和生长因子，诱导血管平滑肌细胞增殖和迁移，伴随斑块表面胶原纤维不断生成、增厚，在斑块表面形成由纤维组织、平滑肌细胞、巨噬细胞和T淋巴细胞构成的纤维帽；再次是粥样斑块期，血管内膜表面隆起灰黄色斑块，斑块核心是富含脂质的主要由泡沫细胞组成的粥样物质；最终，斑块进入不稳定期，形成复合性病变，产生斑块内出血、斑块破裂和血栓形成等^[4,5]。

目前，动脉粥样硬化发病的具体分子机制尚不明确，临床实践对动脉粥样硬化的治疗仍以他汀治疗为主，实践显示，所述药物只能起到控制、减缓病程的作用，对于已形成的斑块，临床上尚未显示有效果确切的治疗药物^[6,7]。

有研究报道了SIRPα-CD47信号通路在动脉粥样硬化领域的应用；所述AS的斑块核心中堆积了大量吞噬了脂质而形态功能改变的泡沫细胞，主要来源于巨噬细胞、平滑肌细胞等；其本该被周围的巨噬细胞等固有免疫细胞吞噬清除，但巨噬细胞对其却“视而不见”^[8,9]。所述斑块核心里的泡沫细胞积累会导致斑块扩大、血管狭窄、炎症恶化等，但是其积累的原因尚不完全明确。有研究指出，该类细胞表面高表达CD47蛋白是其阻断吞噬的重要原因之一^[10,11]。

CD47是一种在多种细胞表面表达的跨膜糖蛋白，对免疫系统有重要的负调节作用^[12]，尤其是对巨噬细胞的调控，CD47能和巨噬细胞上的SIRPα分子相互作用从而向巨噬细胞传导“Don’t eat me”的信号，最终抑制巨噬细胞的吞噬和其功能而CD47在癌症细胞和动脉粥样硬化斑块细胞的高表达，可以给巨噬细胞无法正常清除病变的斑块中的泡沫细胞，导致固有免疫的失效^[13,14]。

Yoko kojima等研究证实^[15]，抗CD47抗体可增强巨噬细胞对斑块中的病变细胞的清除能力，对动脉粥样硬化模型小鼠的动脉粥样硬化有显著治疗效果，但抗体尚存在一些问题，例如亲和位点可能与内源性配体不同，从而效果不佳；半衰期短，在体内不稳定，易被代谢清除等。所以选择内源性配体可能会有更好的效果，而SIRPα正是其重要的内源性配体。