[发明专利]抗胶质瘤活性物质青霉碱醚A的制备和用途

说明书

本发明提供一种抗胶质瘤活性物质青霉碱醚A的制备方法，利用一株海洋灰黄青霉菌株ZZ380，用大米培养基培养灰黄青霉，大大提高了抗胶质瘤活性物质青霉碱醚A的产率，克服了现有方法制备青霉碱醚A产量低的不足。所述青霉碱醚A对人胶质瘤细胞增殖具有显著的抑制活性，显示其抗胶质瘤活性强的特色，可与药学上可接受的载体组成各种剂型的药物，用于治疗胶质瘤。因此，青霉碱醚A在制备抗胶质瘤药物方面具有好的应用前景。

技术领域

本发明属医药领域,涉及一种抗胶质瘤活性物质青霉碱醚A的制备和在制备治疗胶质瘤药物中的用途。

背景技术

胶质瘤是全球最常见和死亡率最高的脑肿瘤。由于胶质瘤在生物学行为上呈现浸润性生长，而且多位于脑的重要功能区，要在保证患者脑组织功能完整的情况下将肿瘤完全切除极为困难，所以药物对胶质瘤的防治显得极为重要。替莫唑胺是目前临床上唯一可单独用于胶质瘤治疗的一线药物(金标药)。但是包括替莫唑胺和传统的第一代抗胶质瘤药物卡莫司汀、洛莫司汀、丙卡巴肼和顺铂等均是细胞毒的烷化剂，具有毒副作用大、耐药性和疗效有限等严重不足，而且，新型靶向药物对胶质瘤的效果也不理想。因此，迫切需要研发新型抗胶质瘤药物。

海洋特殊的生态环境,使海洋微生物具有与陆地微生物不同的新陈代谢途径、生存繁殖方式和适应机制,因而产生许多陆地微生物无法产生的化学结构新颖的次级代谢产物。这些代谢物质是发现新型抗肿瘤活性物质或药物先导化合物的重要资源。

中国专利(申请号:2018113087533)公开了抗耐药菌活性化合物青霉碱醚A的制备及其在制备抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌药物方面的应用，所述的青霉碱醚A是从海洋来源的灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)菌株ZZ380在PDB液体培养基中产生的代谢产物。但是，该化合物在PDB液体培养基中的产率很低(0.29μg/mL)。

发明内容

本发明的第一个目的是提供抗胶质瘤活性物质青霉碱醚A的制备，所述的青霉碱醚A的化学结构式为：

所述的青霉碱醚A的制备方法，克服现有方法制备青霉碱醚A产量低的不足，大大提高青霉碱醚A的产量，并通过以下步骤实现：

(1)灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)ZZ380的菌种，所述的灰黄青霉的菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，分类命名为灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)ZZ380，保藏编号CCTCC NO：M 2018344，保藏日2018.06.04，保藏地址：中国-武汉-武汉大学。

(2)灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)ZZ380培养物的制备

将灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)ZZ380的菌种接种到还有大米培养基的三角烧瓶中，在室温条件下静置培养一定时间，得到含有青霉碱醚A的大米培养物。

所述的三角烧瓶为500毫升；所述的每个三角烧瓶的大米培养基的组成为大米40克和3.5％海盐水60毫升；所述的室温条件为20～30℃；所述的培养时间为25～50天。

(3)青霉碱醚A的提取分离

菌株ZZ380的大米培养物用乙酸乙酯提取得到粗提取物。将该粗提取物先用十八烷基硅烷键合硅胶柱层析分离,分别用50％、70％和90％的甲醇洗脱,得到组分I～III,组分III再用制备型高效液相色谱分离纯化,得到纯化合物青霉碱醚A。

所述柱层析的十八烷基硅烷键合硅胶的用量与上柱的样品量比例是25～55克:1.0克；所述的高效液相分离条件是:岛津LC-20AP高效液相色谱仪,富士C₁₈CT-30色谱柱(280×30 mm,10μm),甲醇和水为流动相(91/9,体积比),检测波长210nm,流速为15.0mL/min。