[发明专利]一种D-泛酸钙杂质的检测方法

说明书

本发明属于色谱柱技术领域，具体涉及一种D‑泛酸钙杂质的检测方法，杂质包括β‑丙氨酸、D‑泛酸内酯和泛解酸钠；检测方法为高效液相色谱法，流动相为磷酸盐缓冲液与乙腈体积比为8.5～9.5∶1的混合溶液。上述杂质是影响D‑泛酸钙成品稳定性的关键杂质，本方法所选用的高效液相色谱法能使D‑泛酸钙色谱峰以及各杂质峰之间均实现很好的分离，并同时准确测定出待测样品中上述各杂质的含量，检测灵敏度高、检测限低，便于在D‑泛酸钙的生产过程对上述杂质进行检测。

技术领域

本发明属于色谱柱技术领域，具体涉及一种D-泛酸钙杂质的检测方法。

背景技术

D-泛酸钙在临床中主要用于泛酸钙缺乏(主要表现为吸收不良综合征、热带口炎性腹泻、乳糜泄、局限性肠炎等)的预防和治疗或应用泛酸钙拮抗药物时。还可用于维生素B缺乏症、周围神经炎、手术后肠绞痛以及其他疾病(如链霉素中毒、术后肠梗阻、类风湿等)的辅助治疗。

目前，在D-泛酸钙的实际生产中需要对其中间产品、成品进行取样检验，以了解杂质情况。现有技术中对于D-泛酸钙中杂质的检测方法大多采用薄层色谱法进行检测，灵敏度低、检测时间长(一般至少需要3～4小时)，并且无法对具体某一种杂质进行定性和定量分析；用于D-泛酸钙检测的高效液相色谱法主要以外标法来检测杂质的总含量，无法得知具体某一种杂质的含量，且回收率低、准确度等有待进一步提高。而杂质检测的准确性、精密度、检测限等问题对于判断中间产品或成品质量具有重要意义，特别是β-丙氨酸、D-泛酸内酯和泛解酸钠等生产D-泛酸钙的中间体，作为成品杂质其含量应在D-泛酸钙生产过程中严格控制，但现有技术中并没有对以上各杂质的检测方法。

发明内容

针对现有技术中无法具体杂质含量的技术问题，本发明提供一种D-泛酸钙中杂质的检测方法。

为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：

一种D-泛酸钙中杂质的检测方法，所述杂质包括β-丙氨酸、D-泛酸内酯和泛解酸钠，所述检测方法为高效液相色谱法，流动相为磷酸盐缓冲液与乙腈的混合溶液；所述磷酸盐缓冲液与所述乙腈的体积比为8.5～9.5∶1；所述磷酸盐缓冲液的pH为2～4。

本方法所提供的杂质为合成D-泛酸钙的中间体，是D-泛酸钙成品中影响成品稳定性的关键杂质，对其进行准确检测能够有助于控制成品中的杂质含量，从而提高成品质量。本方法所选用的高效液相色谱法中的流动相能使D-泛酸钙色谱峰以及各杂质峰之间均实现很好的分离，能够同时准确测定出待测样品中多种杂质的含量，检测灵敏度高、检测限低，便于在D-泛酸钙的生产过程对中间产品和成品进行多种杂质检测。并且本发明所采用的高效液相色谱法检测时间短，能够显著提高检测的工作效率。

优选地，所述磷酸盐缓冲液为0.02mol/L的磷酸二氢钾缓冲液。将该溶液与乙腈混合用于流动相，可以使检测基线平稳，且D-泛酸钙色谱峰及上述杂质色谱峰能够有效分离、峰形良好。

优选地，所述磷酸盐缓冲液与乙腈的体积比为9∶1。在该比例下可以获得更完善的峰形。

优选地，所述磷酸盐缓冲液的pH为3.0。

优选地，所述高效液相色谱法的检测波长为205～215nm。

优选地，所述高效液相色谱法的柱温为25～35℃。该柱温范围接近室温，容易控制温度使其稳定，样品在该温度范围内分离良好。

优选地，所述流动相的流速为0.7～1.0mL/min。

优选地，所述高效液相色谱法的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱。

优选地，上述检测方法包括如下步骤：

步骤a、配制所述杂质的对照品溶液；