[发明专利]一种单颗粒水平上的均相免疫分析方法在审

专利信息
申请号: 201910396483.4 申请日: 2019-05-14
公开(公告)号: CN110133246A 公开(公告)日: 2019-08-16
发明(设计)人: 盖宏伟;张玉苏;刘晓君 申请(专利权)人: 江苏师范大学
主分类号: G01N33/532 分类号: G01N33/532;G01N33/58;G01N21/47;G01N30/02;G01N30/74
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 221000 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 金颗粒 夹心结构 免疫分析 单颗粒 载玻片 散射 正态分布 量子点 抗原 成像 照射 暗场显微镜 等离子共振 检测灵敏度 金纳米颗粒 比例定量 捕获抗体 检测抗体 能量转移 强度降低 样品加入 混合液 溶液滴 样品量 孵育 修饰 制备 震荡 检测 记录 统计
【权利要求书】:

1.一种单颗粒水平上的均相免疫分析方法,其特征在于,包括以下步骤:

S1:将捕获抗体和检测抗体分别修饰在金纳米颗粒CA-AuNP和量子点DA-QD上;

S2:将样品加入到CA-AuNP和DA-QD混合液中,震荡、孵育一段时间,形成CA-AuNP-抗原-DA-QD的夹心结构;

S3:取S2制备的溶液滴于载玻片上,将载玻片置于暗场显微镜下成像;

S4:照射载玻片一段时间,在照射过程中记录金颗粒的散射强度;夹心结构中的金颗粒与量子点发生等离子共振能量转移,导致金颗粒散射强度降低;没有形成夹心结构的CA-AuNP散射强度与颗粒数目分布为正态分布,以该正态分布的期望值为基准值,统计步骤S4中低于和高于基准值的金颗粒数目,计算两者比例;

S5:将步骤S4中的低于基准值的金颗粒数量与高于基准值的金颗粒数量之比与抗原浓度关联。

2.根据权利要求1所述的分析方法,其特征在于,所述步骤S1中的金纳米颗粒包括金纳米球、金纳米棒、金纳米星和不规则的金纳米颗粒;所述步骤S2中的孵育时间为10~100分钟;所述步骤S3具体包括:取1~5微升S2制备的溶液滴于载玻片上,将载玻片置于暗场显微镜下成像;所述步骤S4中的照射时间为2~30分钟;所述步骤S5中的关联为以步骤S4获得的比例为纵坐标,以抗原浓度的对数值为横坐标获得标准曲线或标准加入法。

3.权利要求1-2任一所述的分析方法在简单溶液中肿瘤标志物定量检测中的应用。

4.权利要求1-2任一所述的分析方法在血清肿瘤标志物定量检测中的应用。

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