[发明专利]一种一步式胚胎培养液

说明书

本发明公开了一种一步式胚胎培养液，本发明中一步式胚胎培养液，包含对胚胎培养和发育起着重要作用的物质：(±)‑α‑硫辛酸、乙酰L‑肉碱或乙酰L‑肉碱盐酸盐以及胰岛素、转铁蛋白、硒、Fetuin‑A、血小板源生长因子PDGF(Platelet derived growth factor，PDGF)。利用该组物质制备的一步式胚胎培养液既保留了胚胎培养发育过程中分泌入培养液中的有利成分，起到保护促进细胞生长发育并抑制细胞分解利用有害产物的作用，又避免了胚胎在移植过程中可能受到的机械损伤和培养环境变化造成的应激反应而导致的囊胚形成率不高的问题。

技术领域

本发明属于胚胎细胞培养领域，具体涉及一种一步式胚胎培养液。

背景技术

IVF，in vitro fertilization(体外受精)：又称试管婴儿，是指分别将卵子与精子取出后，置于试管内使其受精，再将胚胎前体——受精卵移植回母体子宫内发育成胎儿。

IVF培养通常分为两种流程即两种培养液系列：全程(单/一步式培养液系列)和分程(双培养液系列)。利用双培养液系列流程对胚胎早期和后期阶段提供不同的培养液成份，但也丢失了由胚胎分泌入培养液中的重要的有效成份，如胚胎营养因子。全程培养液系列流程保留了这些重要的有效成份，但也保留了培养液中有害的分解产物。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的在于提供一种用于体外胚胎培养发育的一步式胚胎培养液制备所需的重要物质。本发明的一步式胚胎培养液保留了胚胎分泌入培养液中的有效成分，能起到保护细胞促进胚胎高效率生长发育并抑制细胞分解利用有害产物的作用。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

用于制备一步式胚胎培养液的重要组合物，所述组合物由(±)-α-硫辛酸、乙酰L-肉碱或乙酰L-肉碱盐酸盐以及胰岛素、转铁蛋白、硒、Fetuin-A、血小板源生长因子PDGF(Platelet derived growth factor，PDGF)组成。

关键物料为血清替代物，由胰岛素、转铁蛋白、硒、Fetuin-A、人血小板源生长因子PDGF组成：

胰岛素是由胰脏内的胰岛β细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一种蛋白质激素，能够促进细胞对培养液中葡萄糖的代谢利用，促进细胞中的脂肪、蛋白质合成，促进外周培养液中 K+、Mg²⁺穿过细胞膜进入细胞内，促进脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)及三磷酸腺苷(ATP)的合成，对胚胎细胞体外发育具有重要的促进作用。

转铁蛋白是血浆中主要的铁传递蛋白，负责运载由消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁，为细胞内化和细胞代谢提供所需的铁。所有的细胞生长都离不开转铁蛋白。不但维持正常的细胞代谢依赖于以生物活性形态存在的铁，铁还是一些酶的辅助因子，比如RNA聚合酶，DNA合成酶，同时也是血红蛋白的重要组成部分。

硒是动物和人体中一些抗氧化酶(谷胱甘肽过氧化物酶)和硒-P蛋白的重要组成部分，在体内起着平衡氧化还原氛围、提高人体免疫力的作用。硒在人体组织内含量为千万分之一，但它却决定了生命的存在，其对人类健康的巨大作用是其他物质无法替代的，缺硒会直接导致人体免疫能力下降，已被作为人体必需的微量元素。

Fetuin-A是一种由肝脏合成的59kD的糖蛋白，属于cystatin蛋白超家族 (半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族)中的一员，也是血清中最主要的蛋白之一，具有多种生物学功能，包括骨骼形成、胎儿大脑及组织发育、体外促进细胞增殖等。

PDGF是一种重要的促有丝分裂因子，具有刺激特定细胞群分裂增殖的能力。