[发明专利]用于指导普伐他汀药物个体化用药相关基因检测的引物组合、试剂盒及方法

说明书

本发明公开了一种用于指导普伐他汀药物个体化用药相关基因检测的引物组合，其特征在于，包括针对SLCO1B1(rs4149015)、HMGCR(rs17244841)、LDLR(rs1433099)基因位点的特异性引物及探针。本发明还公开了其试剂盒和方法。本发明具有操作简单、经济、检测快速、准确性高、特异性好及结果判读简单的特点，实现对用于普伐他汀药物个体化用药相关基因多态性的快速及准确测定，以降低临床普伐他汀药物常见用药的不良反应，降低医疗成本，节约社会资源。

技术领域

本发明涉及体外诊断技术领域，具体涉及一种用于指导普伐他汀药物个体化用药相关基因检测的引物组合、试剂盒及方法。

背景技术

高脂血症为临床上常见的代谢疾病，是因脂肪代谢或转异常导致血浆一种或多种脂质高于正常指标的疾病。高血脂症是一种血脂水平偏高的慢性疾病，其发病原因较为复杂，年龄、性别、遗传、环境和不良的生活习惯均会导致该病的发生。临床研究表明，高血脂是多种心血管疾病的诱发因素，如动脉粥样硬化、冠心病等。近些年，随着人们物质生活的不断提高，该病的发病率也逐年增高，目前该病是公认的心肌梗死、脑卒中等致残、致死性动脉粥样硬化性病变的独立危险因素之一，并与糖尿病、心血管疾病发生有关。

普伐他汀被FDA批准用于治疗家族祖性高胆固醇血症，临床上主要用于饮食限制仍不能控制的原发性高胆固醇血症或合并有高甘油三酯血症患者(IIa和IIb型)。HMG-CoA还原酶(HMGCR)是体内胆固醇合成的关键酶，是普伐他汀的作用靶点。研究表明，HMGCR基因相关位点突变会降低普伐他汀的降脂疗效。

《药物代谢酶和药物作用靶点基因检测技术指南(试行)》指出：对药物代谢酶和药物靶点基因进行检测，可指导临床针对特定的患者选择合适的药物和给药剂量实现“个体化”用药，从而提高药物治疗的有效性和安全性。建议临床上根据SLCO1B1基因型选择他汀类药物进行治疗。

家族祖性高胆固醇血症通常是由LDLR基因突变导致的，其检测位点为rs1433099。LDLR(rs1433099)基因座的遗传变异可影响基线脂质，普伐他汀反应和接受他汀类药物治疗的受试者的CVD风险。普伐他汀对rs1433099位点突变纯合型(CC)患者的治疗效果比野生型纯合子型(TT)差。

综上，通过对基因多态性的检测判断患者是否存在普伐他汀抗性，以便通过增加普伐他汀剂量、增加使用频率、增加新药等措施降低高脂血症的发生。

目前市场上还没有针对普伐他汀耐药性检测的基因检测试剂盒，临床上基因检测类试剂盒多采取Sanger测序法、高分辨率溶解曲线法、芯片杂交法检测基因多态性。但上述方法存在以下问题，其中Sanger测序包括PCR扩增、PCR产物纯化、DNA测序等操作，步骤繁琐，实验耗时长，专业技术要求高，且测序花费高，不适合临床推广；高分辨率溶解曲线法对设备要求特殊，且检测灵敏度不高，也不适合临床推广；芯片杂交法检测灵敏度低且特异性差，容易出现假阳性结果。荧光定量PCR的检测方法较以上方法，其拥有成本低、灵敏度高、特异性强，结果的重复性好等优点，2小时内可完成Sanger测序12-13小时才能完成的通量，大大缩短了临床检测时间，是一种非常好的基因多态性检测手段，Genotyping基因分型散点图是基于荧光定量PCR的一种更简单快速直观判读基因型的检测方法，但是目前没有基于该方法的用于指导普伐他汀药物个体化用药相关基因检测的如权利要求中的引物组合及试剂盒产品。

发明内容

为了解决传统临床经验医疗方式诊断及普伐他汀药物用药时易出现临床用药不良反应且没有合适的试剂盒产品的技术问题。

本发明的目的之一在于提供一种用于指导普伐他汀药物个体化用药相关基因检测的引物组合。

本发明的目的之二在于提供保护所述引物组合的试剂盒，所述试剂盒使用起来操作简单、检测快速、准确性高及特异性好。

本发明的目的之三在于所述试剂盒在指导普伐他汀药物个体化用药相关基因方面的检测方法。