[发明专利]一种谷类作物中有机毒素样品振动净化检测方法及其超声移液枪

说明书

本发明提供了一种谷类作物中有机毒素样品净化萃取检测方法及其超声移液枪，属于化学分析检测技术领域，检测步骤包括：样品提取，样品净化，振动萃取，样品排液；将移液技术与样品净化技术相结合，可以实现在液体移取的同时，完成待测样品的净化过程，大大节省了操作步骤，保证了检测精度。

技术领域

本发明属于化学分析检测技术领域，具体涉及一种谷类作物中有机毒素样品振动净化检测方法及其超声移液枪。

背景技术

粮食作物尤其是谷物类作物，从最初的人工种植或机械收割，到干燥去壳而最终入仓，需要经历漫长的存储加工过程。普通粮食的存储，往往不在谷类作物中添加任何防腐成分，单靠干燥脱水存储。因此，常常因加工存储不当或流转时间过长而发生粮食霉变。

粮食中的有机毒素是由各种霉菌代谢产生，例如玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、黄曲霉素等，是多种剧毒的致癌物。粮食加工前序工艺非常重要的一步就是毒性成分分析，分析前需要对干扰的粮食物质进行净化萃取处理。常用的粮食净化方法多采用净水清洗、水泡以及蒸煮灭菌等方式，再采用对应有机溶剂固相萃取。

然而，①上述方法需要专门的粮食处理设备，成本高，不利于快速检测及野外采集检测的环境。②在净化过程中，样品仅靠重力与硅胶吸附作用慢慢流经固相柱，耗时过长且操作不便，并且植物类材料颗粒容易堵塞柱体，影响净化产率。③样品在净化后需要额外步骤转移到检测设备当中进行检测。其难以避免与外界环境发生接触，容易引起二次污染，影响检测的精度。移液枪是分析检测过程必备的液体移取工具，移液精度高，广泛应用于粮食、环境、生物检测领域。

发明内容

为了提高检测工作效率，提高检测精度，本发明提供一种谷类作物中有机毒素样品净化萃取检测方法，将移液技术、样品净化技术以及超声萃取技术相结合，可以实现在液体移取的同时，完成待测样品的超声萃取过程，大大节省了操作步骤，保证了检测精度。

本发明提供一种谷类作物中有机毒素样品净化萃取检测方法，检测步骤包括：(1)样品提取：取待检样品用提取溶剂定容，振荡提取，收集上清液为样品提取液；(2)样品净化：采用移液枪定量吸取样品提取液，使提取液流经/流过净化材料，继续定量吸取空气，鼓动样品提取液内气泡，使移液枪头内净化材料吸附杂质；(3)振动萃取：采用移液枪超声振动样品提取液，使气泡在净化材料孔隙中与样品提取液破碎混合，使净化材料在气液界面进一步萃取杂质；(3)样品排液：将净化后的样品排出，送至检测设备上机检测；

其中，在步骤(2)中，样品净化步骤包括：①取出枪头，安装于移液枪，将枪头伸入待净化样品液面以下，按下移液枪，使移液枪在枪头内产生负压吸液，吸入1ml待净化样品，使净化样品流经/流过净化样品，停留5s；②将移液枪枪头移出液面，再次按下移液枪，使移液枪内枪头内产生负压吸液，吸入1ml空气，鼓动样品提取液内气泡，使液体与净化材料充分混合，重复此步骤三次，共吸入4ml空气移液枪显示5000ul ALL满载；③打开移液枪超声换能器，超声振动移液枪内样品提取液及净化材料，④将枪头对准2ml样品瓶，按下移液枪排液，收集净化液上机分析。

其中，在步骤(1)中，提取步骤包括：称取5g谷类作物样品粉碎，过1mm分样筛，于50mL离心管中，用提取液(95wt％乙腈/水)分散定容到20mL，涡旋混匀；超声提取30min，放入离心机(8000r/min离心20min)，取上清液作为样品提取液。所述谷类作物优选为植物类谷类作物，包括玉米、小麦和大米；有机毒素包括玉米赤霉烯酮、展青霉素和呕吐毒素。

其中，在步骤(3)中，通过高效液相色谱(HPLC)进行分析，玉米赤霉烯酮检测条件为：

流动相：A相，水；B相，乙腈-甲醇-水(46:8:46，v:v:v)；

等梯度洗脱条件：A，68％；B，32％；

色谱柱：C18柱(柱长250mm，柱内径4.6mm，填料粒径5μm)；