[发明专利]血源性女性自体生殖干细胞的制备方法、试剂盒及应用在审

专利信息
申请号: 201910402537.3 申请日: 2019-05-15
公开(公告)号: CN110129257A 公开(公告)日: 2019-08-16
发明(设计)人: 林雄斌 申请(专利权)人: 林柳吟
主分类号: C12N5/0735 分类号: C12N5/0735;C12N5/078;C12N5/073;C12N5/071;C12N5/077;A61K35/545;A61P15/00;A61P15/08;C40B40/00
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 545001 广西壮族自治区柳州市*** 国省代码: 广西;45
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摘要:
搜索关键词: 自体生殖干细胞 血源性 女性 试剂盒 制备 细胞培养液 自体血液 细胞 非转基因 原料细胞 应用 取材 生产
【权利要求书】:

1.一种血源性女性自体生殖干细胞的制备方法,其特征在于,所述方法包括:

将人的体细胞在细胞培养液O1中培养3天,所述细胞培养液O1为RPMI1640、并含有: 2-10%的血清替代品(KSR);EPO 1-1000 ng/ml;M-GSF 1-1000 ng/ml;G-GSF 1-1000 ng/ml;IL-3 1-1000 ng/ml;IL-6 1-1000 ng/ml;SCF 1-1000 ng/ml;bFGF 1-1000 ng/ml;Nanog1-1000 ng/ml;Oct4 1-1000 ng/ml;Sox2 1-1000 ng/ml;c-myc 1-1000 ng/ml;然后换用细胞培养液O2培养6-9天,所述细胞培养液O2为M2培养液、并含有: 2-10%的血清替代品(KSR);Nanog 1-1000 ng/ml;Oct4 1-1000 ng/ml;Sox2 1-1000 ng/ml;myc 1-1000 ng/ml;DDX4(Mvh) 1-1000 ng/ml;Dazl 1-1000 ng/ml;bFGF 1-1000 ng/ml;EGF 1-1000 ng/ml;IL-6 1-1000 ng/ml;Sox17 1-1000 ng/ml;VASA 1-1000 ng/ml;SCF 1-1000 ng/ml;G-GSF 1-1000 ng/ml;再换用细胞培养液O3继续培养6-9天,所述细胞培养液O3为M16培养液、并含有: 2-10%的血清替代品(KSR);RA 1-1000 uM;DMC1 1-1000 ng/ml;PRDM1 1-1000ng/ml;PGK2 1-1000 ng/ml;hCG 1-300iu/ml; 孕酮1-300iu/ml; 雌二醇 1-300iu/ml;FSH1-1000 ng/ml;DDX4(Mvh) 1-1000 ng/ml;Dazl 1-1000 ng/ml;Oct4 1-1000 ng/ml;Sox171-1000 ng/ml;VASA 1-1000 ng/ml;bFGF 1-1000 ng/ml;VASA 1-1000 ng/ml;GF 2 1-1000 ng/ml; FGF 7 1-1000 ng/ml;BMP2 1-1000 ng/ml;BMP4 1-1000 ng/ml;IL-6 1-1000 ng/ml;NT 4 1-1000 ng/ml;GDNF 1-1000 ng/ml;Activin A 1-1000 ng/ml;UB 1-1000 ng/ml;17α,20β-DHP 1-1000 ng/ml;AY9944-A-7 1-1000 ng/ml;EGF 1-1000 ng/ml;VEGF 1-1000 ng/ml;SCF 1-1000 ng/ml;IGF 1-1000 ng/ml;IGF I 1-1000 ng/ml;IGF II1-1000 ng/ml;GRF 1-1000 ng/ml;Ifitm3 1-1000 ng/ml;GH 1-1000 ng/ml;地塞米松1-1000 ng/ml;G-GSF 1-1000 ng/ml;获得人血源性自体生殖干细胞;

培养条件,在5% CO2和37℃条件下进行细胞培养。

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