[发明专利]血源性女性自体生殖干细胞的制备方法、试剂盒及应用在审
【权利要求书】:
1.一种血源性女性自体生殖干细胞的制备方法,其特征在于,所述方法包括:
将人的体细胞在细胞培养液O1中培养3天,所述细胞培养液O1为RPMI1640、并含有: 2-10%的血清替代品(KSR);EPO 1-1000 ng/ml;M-GSF 1-1000 ng/ml;G-GSF 1-1000 ng/ml;IL-3 1-1000 ng/ml;IL-6 1-1000 ng/ml;SCF 1-1000 ng/ml;bFGF 1-1000 ng/ml;Nanog1-1000 ng/ml;Oct4 1-1000 ng/ml;Sox2 1-1000 ng/ml;c-myc 1-1000 ng/ml;然后换用细胞培养液O2培养6-9天,所述细胞培养液O2为M2培养液、并含有: 2-10%的血清替代品(KSR);Nanog 1-1000 ng/ml;Oct4 1-1000 ng/ml;Sox2 1-1000 ng/ml;myc 1-1000 ng/ml;DDX4(Mvh) 1-1000 ng/ml;Dazl 1-1000 ng/ml;bFGF 1-1000 ng/ml;EGF 1-1000 ng/ml;IL-6 1-1000 ng/ml;Sox17 1-1000 ng/ml;VASA 1-1000 ng/ml;SCF 1-1000 ng/ml;G-GSF 1-1000 ng/ml;再换用细胞培养液O3继续培养6-9天,所述细胞培养液O3为M16培养液、并含有: 2-10%的血清替代品(KSR);RA 1-1000 uM;DMC1 1-1000 ng/ml;PRDM1 1-1000ng/ml;PGK2 1-1000 ng/ml;hCG 1-300iu/ml; 孕酮1-300iu/ml; 雌二醇 1-300iu/ml;FSH1-1000 ng/ml;DDX4(Mvh) 1-1000 ng/ml;Dazl 1-1000 ng/ml;Oct4 1-1000 ng/ml;Sox171-1000 ng/ml;VASA 1-1000 ng/ml;bFGF 1-1000 ng/ml;VASA 1-1000 ng/ml;GF 2 1-1000 ng/ml; FGF 7 1-1000 ng/ml;BMP2 1-1000 ng/ml;BMP4 1-1000 ng/ml;IL-6 1-1000 ng/ml;NT 4 1-1000 ng/ml;GDNF 1-1000 ng/ml;Activin A 1-1000 ng/ml;UB 1-1000 ng/ml;17α,20β-DHP 1-1000 ng/ml;AY9944-A-7 1-1000 ng/ml;EGF 1-1000 ng/ml;VEGF 1-1000 ng/ml;SCF 1-1000 ng/ml;IGF 1-1000 ng/ml;IGF I 1-1000 ng/ml;IGF II1-1000 ng/ml;GRF 1-1000 ng/ml;Ifitm3 1-1000 ng/ml;GH 1-1000 ng/ml;地塞米松1-1000 ng/ml;G-GSF 1-1000 ng/ml;获得人血源性自体生殖干细胞;
培养条件,在5% CO2和37℃条件下进行细胞培养。
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