[发明专利]一种含铁蛋白的荧光鉴定方法

权利要求书

1.一种含铁蛋白的荧光鉴定方法，其特征在于：包括如下步骤：

1）石墨烯量子点的制备

称取直链淀粉，溶于25 mL蒸馏水中，60 ℃水浴加热15 min，转入反应釜中，烘箱中加热，自然冷却后移出，离心得黄色澄清液体于冰箱中冷藏，备用；

2) 石墨烯量子点与蛋白质的相互作用

取步骤1）中的石墨烯量子点溶液和蛋白质水溶液1：1 V/V混合，混匀，再加入与石墨烯量子点溶液同等体积的纯水，混匀，离心，取上清于 微量石英比色皿中，荧光光谱扫描；

步骤1）中直链淀粉来源土豆，分子式(C₆H₁₀O₅)n，分子量502.42，直链淀粉用量0.1~0.5g；

步骤1）中反应釜体积50 mL，水热反应温度150~250 ℃，反应时间0.5~5 h，高速离心转速10000~16000 r/min，离心10~3 min，所得石墨烯量子点溶液为黄色澄清液；

步骤2）中蛋白为辣根过氧化物酶、细胞色素C、肌红蛋白、马脾铁蛋白、转铁蛋白、牛血红蛋白、刀豆蛋白、牛血清白蛋白、卵清蛋白、溶菌酶中的一种，蛋白质水溶液浓度范围0.01~10 mg/mL；

步骤2）中含铁蛋白：辣根过氧化物酶、细胞色素C、肌红蛋白、马脾铁蛋白、转铁蛋白、牛血红蛋白可有效猝灭石墨烯量子点荧光，其余不含铁蛋白：刀豆蛋白、牛血清白蛋白、卵清蛋白、溶菌酶对石墨烯量子点荧光无显著影响；

步骤2）中荧光光谱扫描条件为激发波长360 nm，光谱扫描范围390-450 nm，最大发射波长是440 nm；荧光光谱分析前混合样品需要离心，去沉淀，取上清液。