[发明专利]一种黄烷-4-醇苷的提取方法

说明书

本发明涉及药物分离技术领域，公开了一种黄烷‑4‑醇苷的提取方法，包括：(1)将鸡血七的干燥根茎粉碎后，用溶剂热回流提取得到提取液，去除所述提取液中的溶剂，得到粗提物；(2)将粗提物用氯仿萃取得到萃取液，去除所述萃取液中的溶剂，得到氯仿萃取物；(3)将氯仿萃取物进行硅胶色谱层析，依次采用不同体积比的石油醚‑氯仿‑甲醇混合液和氯仿‑丙酮混合液进行梯度洗脱，分别收集洗脱液；(4)将步骤(3)中经体积比为10‑5:1的氯仿‑丙酮混合液洗脱所得的洗脱液A进行硅胶色谱层析，洗脱后得到洗脱液B；(5)采用薄层层析刮板法以氯仿‑丙酮混合液作为展开剂，对所述洗脱液B进行纯化即得。本发明所述方法可靠稳定、样品纯度高。

技术领域

本发明涉及药物分离技术领域，具体涉及一种黄烷-4-醇苷的提取方法。

背景技术

鸡血七，披针新月蕨Pronephriumpenangianum(Hook.)Holtt.，为金星蕨科新月蕨属植物，别名鸡血莲、活血莲、散血莲等，其性凉，味苦、微甘。土家族经常使用的一种民间药，全草入药，能舒筋活络、止血、镇痛，主治劳伤、痢疾、跌打损伤、血凝气滞、月经不调、外伤出血。现代医学研究表明披针新月蕨具有抗炎，抗肿瘤，抗氧化，抗胰腺干细胞纤维化，抑制前列腺增生，神经保护等作用。

近年来，研究发现金星蕨科蕨类植物中含有许多结构新颖的黄酮，如黄烷-4-醇苷类(flavan-4-ols)，3-去氧花青素(3-deoxyanthocyanins)，碳甲基黄酮(C-methylflavonoids)和B环修饰的黄酮(flavones with modified B-ring)。国内外研究报道发现已从披针新月蕨中分离得到了43个化合物，其中主要成分为黄酮类化合物，包括黄烷-4-醇苷类化合物24个、二氢黄酮3个、花色素苷2个、黄酮1个、黄酮醇苷2个、二氢查耳酮苷1个、苯骈二氧六环木质素1个、降木脂素2个、甘油糖脂1个、有机酸类化合物4个、甾醇和甾醇苷2个，其中22个化合物为新化合物。已有研究表明黄烷-4-醇苷具有较强的体外抗癌活性，并对雄激素依赖性前列腺癌细胞的体外生长有抑制作用，但披针新月蕨中黄烷-4-醇苷的浓度较低，必须加以富集，才能成为有利用价值的产品，因此，分离提取黄烷-4-醇苷的方法具有极高的开发利用价值。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术存在的问题，提供一种黄烷-4-醇苷的提取方法，该提取方法能够有效提高(2S，4R)-6，8-二甲基-7-羟基-4'-甲氧基-4，2”-氧化黄烷-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的提取效果。

为了实现上述目的，本发明一方面提供一种黄烷-4-醇苷的提取方法，包括如下步骤：

(1)将鸡血七的干燥根茎粉碎后，用溶剂热回流提取得到提取液，去除所述提取液中的溶剂，得到粗提物

(2)将步骤(1)所得的粗提物用氯仿萃取得到萃取液，去除所述萃取液中的溶剂，得到氯仿萃取物；

(3)将步骤(2)所得的氯仿萃取物进行硅胶色谱层析，采用不同体积比的石油醚-氯仿-甲醇混合液和不同体积比的氯仿-丙酮混合液进行梯度洗脱，分别收集洗脱液；

(4)将步骤(3)中经体积比为10-5:1的氯仿-丙酮混合液洗脱所得的洗脱液A进行硅胶色谱层析，以氯仿-丙酮混合液作为洗脱溶剂，洗脱后得到洗脱液B；

(5)采用薄层层析刮板法以氯仿-丙酮混合液作为展开剂，对步骤(4)所得的洗脱液B进行纯化，得到黄烷-4-醇苷，

其中，所述黄烷-4-醇苷为(2S，4R)-6，8-二甲基-7-羟基-4'-甲氧基-4，2”-氧化黄烷-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

优选地，步骤(1)中所述溶剂为水、乙醇、甲醇、正丁醇、乙酸乙酯中的一种或多种，所述回流提取的次数为2-6次，每次所述回流提取中鸡血七的干燥根茎与溶剂的重量比为1:2-15、提取时间为2-4h。