[发明专利]一种基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法在审

专利信息
申请号: 201910417790.6 申请日: 2019-05-20
公开(公告)号: CN110146691A 公开(公告)日: 2019-08-20
发明(设计)人: 张火兵;王师;童能胜 申请(专利权)人: 北京中同蓝博临床检验所有限公司
主分类号: G01N33/53 分类号: G01N33/53;G01N15/14
代理公司: 北京众达德权知识产权代理有限公司 11570 代理人: 刘杰
地址: 100160 北京市丰台区南四环西路12*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 检测 流式细胞术 快速检测 多聚甲醛溶液 快速检测技术 外周血样本 标本用量 试剂用量 对流式 共孵育 集约化 溶血素 上流式 细胞仪 富集 混匀 抗体 流式 鞘液 洗涤 细胞 优化
【权利要求书】:

1.一种基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法,步骤包括:将25-30μL外周血样本与15-18μL HLA-B27-FIT/CD3-PE抗体共孵育,加入溶血素,静置后离心去上清,加入鞘液1.5-2.5mL,离心去上清,洗涤后加入多聚甲醛溶液混匀后上流式细胞仪进行检测,检测时将所要收集的细胞设定为2000-2500个。

2.如权利要求1所述的基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法,其特征在于:所述洗涤为采用鞘液洗涤一次。

3.如权利要求1或2所述的基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法,其特征在于:所述上机检测过程中,前期采用中速收集细胞,后期采用高速收集细胞。

4.如权利要求1所述的基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法,其特征在于:所述上机检测的检测时长为20~30s。

5.如权利要求1所述的基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法,其特征在于:所述共孵育条件为:室温下避光静置孵育13-17min。

6.如权利要求1所述的基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法,其特征在于:所述溶血素为1×HLA-B27BD FACS溶血素,溶血素加入量为1.5-2.5mL,加入溶血素后静置8-12min。

7.如权利要求1所述的基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法,其特征在于:所述离心条件为:300g离心4-6min。

8.如权利要求1所述的基于流式细胞术的HLA-B27快速检测方法,其特征在于:所述多聚甲醛溶液质量浓度为1%,多聚甲醛溶液添加量为280-320μL。

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