[发明专利]一种食品脂质提取及检测食品脂质的方法

说明书

本发明提供了一种食品脂质提取方法和食品中脂质的检测方法，所述食品脂质提取方法通过将食品样品与超纯水、甲醇和二氯甲烷进行多次混合和离心，多次离心后所得下层有机相即为脂质。本发明采用少量样本，通过较为安全的脂质提取试剂，经过一次处理，得到不同脂质的提取物后，同时或分别对其进行定性和定量检测。以减少样本用量，提高安全性，节约样品预处理和检测过程中的耗材，降低成本并提高效率。

技术领域

本发明涉及食品提取及检测领域，具体涉及一种食品脂质提取及检测食品脂质的方法。

背景技术

脂质是食品中的主要营养成分，主要包括8大类：脂肪酸、甘油酯(包括甘油三酯、甘油二酯、单甘脂)、甘油磷脂(磷脂酰胆碱PC、磷脂酰乙醇胺PE、磷脂酰肌醇PI、磷脂酰丝氨酸PS、磷脂酰甘油PG、磷脂酸PA)、鞘脂类(神经酰胺Cer、鞘磷脂SM)、糖脂(神经节苷脂GM、GD)、固醇脂类、孕烯醇酮脂、多聚乙烯类。自2003年脂质组学概念被提出以来，食品脂质组学对健康及预防疾病的重要性逐渐被认知。

母乳脂质是人类母乳中仅次于乳糖的第2大组分，主要包括甘油酯、甘油磷脂、固醇脂类和糖脂类，在初乳中含量高达40g/L。母乳不仅为纯母乳喂养婴幼儿生长发育提供了40-55％的能量，磷脂还是细胞和细胞器膜结构不可缺少的成分，并具有抵抗各种代谢疾病的功能，神经节苷脂是大脑脂质和大脑皮层的重要组成物质。我国的母乳喂养率不到29％，母乳成分数据的有力支撑可成为促进母乳喂养的有效方式之一；母乳成分也是婴幼儿奶粉配方设计的黄金标准。因母乳脂质受母亲基因、膳食、环境等因素影响，明确母乳脂质的种类及含量，需检测不同区域、不同哺乳阶段、不同种族等有代表性的母乳样本，建立母乳脂质数据库。但母乳是婴幼儿尤其是0-6月母乳喂养婴儿的唯一食品，所以母乳样本的采集难度较大，且采集的样本量较少。因此，母乳脂质数据库的建立依赖于高通量的检测方法，既要提高检测通量，又要减少母乳样本用量，并确保大批量样本检测过程中检测人员的安全性。所以，建立高通量、低样本消耗、安全的母乳脂质检测方法，是分析母乳成分进而促进母乳喂养并开发更加营养健康的婴幼儿配方粉的必要前提。

各种固体、液体食品设计时，脂质组成是其营养功能的重要方面。尤其为了设计更加科学合理的婴幼儿配方食品，需对现有的婴幼儿配方食品中脂质组成进行检测，并对不同婴幼儿食品配料中的脂质组成进行定性和定量分析。同样都需要高通量、安全检测技术。

目前，食品尤其是母乳、乳品及配料中脂质的检测方法主要是基于检测甘油酯、磷脂(包括甘油磷脂和鞘磷脂)、脂肪酸、神经节苷脂的不同目标，将样品分别经不同方法前处理后，采用不同的仪器方法检测。其中前处理方法主要包括传统的Folch法和BlighDyer法提取甘油酯或磷脂：

1)Folch法

25倍稀释，2g奶+50g氯仿/甲醇2:1+5mlNaCl(0.05M)，200rpm摇20min，5000rpm离心20min，去除底层氯仿层，上层甲醇层加入35ml氯仿，重复上述过程，下层氯仿层与上次的混合，蒸干，-20℃保存备用；然后用固相萃取柱把中性甘油酯与极性磷脂分开。

固相萃取具体过程包括：50mg脂质提取物溶解在1mL氯仿/甲醇(95:5，v/v)混合液中，硅胶柱(500mg)先用5mL氯仿/甲醇(95:5，v/v)活化，再加入脂质溶液，甘油三酯用10mL氯仿/甲醇(95:5，v/v)洗脱，磷脂用5mL甲醇和5mL氯仿/甲醇/水(3:5:2,v/v/v)混合溶液洗脱，洗脱液蒸干后，复溶到氯仿/甲醇(2:1,v/v)中用于检测。