[发明专利]一种缬沙坦中正戊酰氯的检测方法

说明书

本发明提供一种缬沙坦中潜在杂质正戊酰氯的检测方法，采用液相色谱‑质谱联用法的技术，用苯胺对缬沙坦中的潜在杂质正戊酰氯进行柱前衍生化生成正戊酰苯胺，从而实现采用普通C18色谱柱进行缬沙坦中潜在杂质正戊酰氯杂质的分离测定。所采用的方法在系统适用性、专属性、精密度、定量限、检测限、线性和范围及耐用性等方面符合中国药典方法验证的指导原则，可用于缬沙坦原料药的质量控制。

技术领域

本发明涉及一种LCMS/MS法测定缬沙坦中正戊酰氯的方法，属于药物分析技术领域。

背景技术

缬沙坦(Valsartan)是一种临床上使用广泛的抗高血压药，具有副作用小，耐受性好的优势，同时可以用于糖尿病、肾病患者的高血压症治疗。其化学名为：N-(1-戊酰基)-N-[4-[2-(1H-四氮唑-5-基)苯基]苄基]-L-缬氨酸，结构式如下式I：

其结构中侧链戊酰基团通常是以正戊酰氯为反应物引入，因此正戊酰氯是潜在的杂质。而酰氯为基因毒杂质警示结构，近年来，随着国内外药政部门相关法规的逐步健全，基因毒性杂质研究已经成为保证产品质量的关键之一。目前，USP、EP、JP和中国药典及相关文献、专利均未见正戊酰氯杂质的报道。

发明内容

本发明提供一种缬沙坦中潜在杂质正戊酰氯的检测方法，采用苯胺对缬沙坦中的潜在杂质正戊酰氯进行柱前衍生化生成正戊酰苯胺，从而实现采用普通C18色谱柱进行缬沙坦中潜在杂质正戊酰氯杂质的分离测定，所采用的方法在系统适用性、专属性、精密度、定量限、检测限、线性和范围及耐用性等方面完全符合中国药典方法验证的指导原则，可用于缬沙坦原料药的质量控制。

本发明提供一种缬沙坦中潜在杂质正戊酰氯的检测方法，该方法包括以下步骤：

（1）配制溶液：分别配制样品空白溶液、正戊酰苯胺储备液、参比溶液和测试溶液；

其中所述的样品空白溶液为苯胺溶液；所述的正戊酰苯胺储备液为正戊酰苯胺溶液；所述的参比溶液为正戊酰苯胺溶液；所述的测试溶液为缬沙坦溶液。

（2）测定方法：分别将空白溶液、样品空白溶液、参比溶液和测试溶液注入液相色谱-质谱联用仪，记录色谱图。其中色谱条件如下：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流速0.5±0.1mL/min；柱温：35±2℃；进样量：0.2μl；流动相为甲酸-甲醇-水体系，进行梯度洗脱。

所述样品空白溶液的配制方法为：向容量瓶中加入苯胺，加稀释液稀释至刻度，摇匀；精密量取适量上述溶液置于另一容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得样品空白溶液；

所述正戊酰苯胺储备液的配制方法为：精密称取正戊酰氯对照品适量于容量瓶中，并移取适量苯胺置于同一容量瓶中，室温振摇混匀，放置，加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取上述溶液适量置另一容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得正戊酰苯胺储备液；

所述参比溶液的配制方法为：精密量取正戊酰苯胺储备液适量置于容量瓶中，加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得参比溶液；

所述测试溶液的配制方法为：精密称取缬沙坦样品适量于容量瓶中，并移取适量苯胺置于同一容量瓶中，室温超声振摇溶解，放置，加稀释液稀释至刻度，摇匀；精密量取上述溶液适量置于另一容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得测试溶液。

所述的空白溶液为稀释液；所述的稀释液为乙腈。

所述乙腈为HPLC级；所述甲醇为HPLC级；所述水为超纯水；所述苯胺为AR及以上；所述正戊酰氯对照品为AR及以上；所述甲酸为AR及以上。