[发明专利]带荧光标记的人源细胞角蛋白混合抗体及其制备方法在审
申请号: | 201910427490.6 | 申请日: | 2019-05-22 |
公开(公告)号: | CN110161227A | 公开(公告)日: | 2019-08-23 |
发明(设计)人: | 江涛;王皓;李男男;仇海燕 | 申请(专利权)人: | 北京中科纳泰生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/533 | 分类号: | G01N33/533 |
代理公司: | 北京三友知识产权代理有限公司 11127 | 代理人: | 韩蕾;姚亮 |
地址: | 102488 北京市房山区拱辰街*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 混合抗体 人源细胞 荧光标记 角蛋白 抗体 制备 循环肿瘤细胞 检测 应用 | ||
1.一种带荧光标记的人源细胞角蛋白混合抗体组合物,其包括CK7、CK18、CK19三种抗体,三种抗体的比例为:(1~5):(1~4):(3~8)。
2.根据权利要求1所述的带荧光标记的人源细胞角蛋白混合抗体组合物,其中,三种抗体的比例为:
CK7:CK18:CK19=X:Y:Z
其中,X=1、2、3、4或5;
Y=1、2、3或4;
Z=3、4、5、6、7或8。
3.根据权利要求1所述的带荧光标记的人源细胞角蛋白混合抗体组合物,其中,所述CK7、CK18、CK19抗体均为Alexa 488标记的兔单克隆抗体。
4.根据权利要求1~3任一项所述的带荧光标记的人源细胞角蛋白混合抗体组合物,该组合物还包括抗体稀释液。
5.一种带荧光标记的人源细胞角蛋白混合抗体,其是权利要求1~3任一项所述的带荧光标记的人源细胞角蛋白混合抗体组合物中的三种抗体,与抗体稀释液混合配制而成的。
6.一种带荧光标记的人源细胞角蛋白混合抗体的制备方法,该方法包括:
将CK7、CK18、CK19分别用抗体稀释液稀释,得到浓度为0.2-10μg/ml的抗体工作液;
将CK7、CK18、CK19抗体工作液按比例混合,得到带荧光标记的人源细胞角蛋白混合抗体;
其中,所述混合抗体中,CK7、CK18、CK19三种抗体的比例为:(1~5):(1~4):(3~8);
优选地,所述混合抗体中,CK7、CK18、CK19三种抗体的比例为CK7:CK18:CK19=X:Y:Z;其中,X=1、2、3、4或5;Y=1、2、3或4;Z=3、4、5、6、7或8。
7.根据权利要求6所述的方法,其中,所述抗体稀释液的成分为每100mL磷酸盐缓冲液(PBS)中包括3g封闭用血清白蛋白。
8.根据权利要求6所述的方法,其中,各抗体工作液中:
CK7抗体浓度为2.5-5μg/ml;
CK18抗体浓度为0.2-2.5μg/ml;
CK19抗体浓度为0.4-3.5μg/ml。
9.权利要求1~4任一项所述的带荧光标记的人源细胞角蛋白混合抗体组合物或权利要求5所述的带荧光标记的人源细胞角蛋白混合抗体在制备外周循环肿瘤细胞检测剂中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其中,所述肿瘤包括乳腺癌、肝癌、肺癌、胃癌、前列腺癌和宫颈癌细胞中的一种或多种;
优选地,所述肿瘤细胞包括SK-BR-3、MCF-7、MDA-MB-231、HeLa、HepG2、HCT-8、H1650、H1975、SNU-5和PC-3中的一种或多种。
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