[发明专利]一种能够同时检测多种抗胆碱药的方法

说明书

本发明公开了一种能够同时检测多种抗胆碱药的方法，所述抗胆碱药至少包括阿托品、山莨菪碱、甲溴东莨菪碱和丁溴东莨菪碱，所述检测方法采用CE‑ESI‑MS，检测过程中分离电压、缓冲液、鞘流液种类及鞘流液流速参数设置如下：分离电压：10～21kV；缓冲液：pH值为9.4的乙酸铵缓冲液；鞘流液种类：添加有乙酸的异丙醇‑水溶液；鞘流液流速：2.0～4.0μL/min。该方案采用CE‑MS联用技术，可实现高效、快速的分离分析，减少了有机溶剂的消耗，相较于现有技术中HPLC‑MS技术，还具有样品量少等优点；本发明方案结合了毛细管电泳的高效分离与质谱的精确定性功能，使得检测结果更为精准。

技术领域

本发明涉及医药检测技术领域，具体涉及一种能够同时检测多种抗胆碱药的方法。

背景技术

托烷类生物碱是一类具有M受体阻断作用的抗胆碱药，已知的天然托烷类生物碱有200多种，它们主要存在于茄科、旋花科和红树科等植物中。具有药理活性的托烷类生物碱主要有阿托品、山莨菪碱和东莨菪碱衍生物等，其中，阿托品具有兴奋中枢神经、散瞳、解痉和抑制腺体分泌等广泛的药理作用，副作用较多，临床上主要用于各种内脏绞痛(如胃痛、肠绞痛、肾绞痛)和散瞳，可以缓解急性有机磷酸酯中毒。山莨菪碱的药理作用与阿托品类似，对乙酰胆碱引起的平滑肌痉挛有松弛作用，也能解除血管痉挛，改善微循环，并有镇痛作用。东莨菪碱衍生物包括甲溴东莨菪碱和丁溴东莨菪碱，甲溴东莨菪碱和丁溴东莨菪碱分别是东莨菪碱与溴甲烷和溴丁烷合成的季铵盐，前者用于溃疡和胃肠道痉挛等，后者除具有平滑肌解痉作用，还有神经肌肉接头和神经节阻滞作用，可作胃肠道内窥镜检查的术前用药。虽然具有药用价值，但由于自身具有毒性，因此，对阿托品、山莨菪碱及东莨菪碱衍生物进行检测分析具有重要意义。

目前，关于托烷类生物碱的检测分析，文献报道的主要有薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳技术以及联用技术(如气相色谱-质谱联用仪(GasChromatography-Mass Spectrometer，GC-MS)法和液相色谱-质谱联用仪(HighPerformance Liquid Chromatography-Mass Spectrometry，HPLC-MS)法)等。其中，薄层色谱法操作繁琐，分析时间较长，且多数情况下只能测定单一成分或某类化合物的含量；气相色谱法在分析前，样品通常需要进行衍生化处理；而高效液相色谱法的分析时间长，分离效率低，色谱柱容易污染，分析成本较高。毛细管电泳(capillary electrophoresis，CE)由于高效、快速、分离模式多等优点在生物碱分析方面具有巨大的潜力，已有多种分离模式被用于分离检测植物提取物和药物制剂中托烷类生物碱，例如毛细管区带电泳(capillaryzone electrophoresis，CZE)、非水毛细管电泳(Nonaqueous capillaryelectrophoresis，NACE)及胶束电动毛细管色谱(Micellar electrokinetic capillarychromatography，MEK)等。上述各种方法虽然都能用于托烷类生物碱的检测，但能够同时检测多种托烷类生物碱的方法并不多，尤其是生物样品中的多种托烷类生物碱。然而，由于在实际使用过程中，通常会同时使用多种托烷类生物碱。中国发明专利申请文件CN201810833435.2公开了一种莨菪碱和东莨菪碱的检测方法，具体公开了通过高效液相色谱法同时检测莨菪碱和东莨菪碱。该方法虽然能够实现东莨菪与莨菪碱的分离分析，但检测时间长达50min且仅能实现两种托烷类生物碱的分离。

综上所述，开发新的检测方法对于实现多种托烷类生物碱的检测分析具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：一种能够简便且快速地实现多种抗胆碱药检测的方法。