[发明专利]琥珀酰丙酮的检测方法在审

专利信息
申请号: 201910428440.X 申请日: 2019-05-22
公开(公告)号: CN110568088A 公开(公告)日: 2019-12-13
发明(设计)人: 陈秀如;张婷;佘旭辉;赵蓓蓓;程雅婷 申请(专利权)人: 广州金域医学检验中心有限公司
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/14
代理公司: 44224 广州华进联合专利商标代理有限公司 代理人: 向薇;郑彤
地址: 510300 广东省*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 样本 目标试样 净化预处理 检测 有机溶剂 工作液 琥珀 丙酮 串联质谱法 衍生化试剂 保护仪器 串联质谱 酸性物质 净化 灵敏度 萃取剂 去除 维护
【权利要求书】:

1.一种琥珀酰丙酮的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:

获取干血斑样本;

净化预处理:向所述干血斑样本中加入有机溶剂,静置后去除有机溶剂,得净化后的干血斑样本;

目标试样提取:采用提取工作液对所述净化后的干血斑样本进行提取,即得目标试样;所述提取工作液中包含有萃取剂、衍生化试剂和酸性物质;

采用液相色谱串联质谱法检测目标试样。

2.根据权利要求1所述的琥珀酰丙酮的检测方法,其特征在于,所述净化预处理中,所述有机溶剂为C1-C3一元醇。

3.根据权利要求2所述的琥珀酰丙酮的检测方法,其特征在于,所述净化预处理中,所述有机溶剂为甲醇。

4.根据权利要求1所述的琥珀酰丙酮的检测方法,其特征在于,所述净化预处理中,向所述干血斑样本中加入干血斑样本30~50倍体积的有机溶剂,静置10min~20min后去除有机溶剂,得净化后的干血斑样本。

5.根据权利要求1所述的琥珀酰丙酮的检测方法,其特征在于,所述目标试样提取,步骤包括:向净化后的干血斑样本中加入提取工作液,在37℃-45℃温度下反应40min~80min;

所述提取工作液中包含有萃取剂、衍生化试剂和酸性物质。

6.根据权利要求5所述的琥珀酰丙酮的检测方法,其特征在于,所述萃取剂为:乙腈与水的混合溶液;和/或

所述衍生化试剂为水合肼;和/或

所述酸性物质为可挥发性酸溶液。

7.根据权利要求6所述的琥珀酰丙酮的检测方法,其特征在于,以v/v计,所述乙腈与水的混合溶液中含水量≥5%;和/或

所述水合肼的浓度≥3mmol/L;和/或

所述可挥发性酸溶液为0.02%-1.00%的草酸溶液。

8.根据权利要求1所述的琥珀酰丙酮的检测方法,其特征在于,所述采用液相色谱串联质谱法检测目标试样中液相色谱条件为:

流动相:为有机溶剂与水的混合溶液,以v/v计,所述有机溶剂与水的混合溶液中含水量≥5%,加入0.02%-1.00%的草酸;

流动相的流速为0.02~1.0mL/min;

液相洗脱时的进样量为10~30μL;

质谱方法为:使用三重四级杆进行检测。

9.根据权利要求8所述的琥珀酰丙酮的检测方法,其特征在于,所述有机溶剂为乙腈或甲醇。

10.根据权利要求1-9任一项所述的琥珀酰丙酮的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:

获取干血斑样本,放入过滤板中;

净化预处理:向过滤板中的干血斑样本中加入有机溶剂,静置后通过离心去除有机溶剂,得净化后的干血斑样本;

目标试样提取:向过滤板中加入提取工作液,对所述净化后的干血斑样本进行提取,即得目标试样;所述提取工作液中包含有萃取剂、衍生化试剂和酸性物质;

采用液相色谱串联质谱法检测目标试样。

11.根据权利要求10所述的琥珀酰丙酮的检测方法,其特征在于,所述过滤板为96管滤盘。

12.根据权利要求11所述的琥珀酰丙酮的检测方法,其特征在于,所述干血斑样本的直径为3-3.5mm。

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