[发明专利]适用于动物源性食品的西马特罗胶体金快速检测卡及其制备方法

权利要求书

1.一种适用动物源性食品的西马特罗胶体金快速检测卡，其特征在于，包括人工制备的西马特罗单克隆抗体和PC-2羊抗鼠抗体成分的胶体金快速检测卡。

2.如权利要求1所述的一种适用动物源性食品的西马特罗胶体金快速检测卡，其特征在于，所述检测卡为检测西马特罗成分，检测卡包括：包括含有胶体金标记的西马特罗单克隆抗体溶液喷涂的金标垫、绘有T线和C线的NC膜、样品垫以及吸水垫，进行组装。

3.一种适用动物源性食品的西马特罗胶体金快速检测卡的制备方法，其特征在于，所述胶体金快速检测卡的制备具体过程为：

（1）金标垫的制备：用1.35%红色金颗粒标记取1mL胶体金溶液于2mL试管中，加入0.2MK₂CO₃ 2.0µL/mL，混匀；加入抗体原液1.0µL，混匀后静置5min；加入含10% BSA的封闭液10µL/mL，混匀后静置5min；4℃，12000r/min离心，5min；1/20体积的复溶液复溶，喷涂于已封闭好的玻璃纤维素膜上，迅速转移至冷冻干燥机内进行冷冻干燥，制作成为金标垫；

（2）C液和T液的制备：用包被液将抗原稀释，将PC-2羊抗鼠250倍稀释制得C液，将制得的人工抗原50倍稀释获得T液；

（3）NC膜的包被：将制备的C液、T液分别在NC膜上划线，从左至右顺序依次为T液和C液，置37℃干燥20~40min，干燥后浸没入封闭液封闭，置于37℃恒温箱中干燥备用；

（4）检测卡的组装：将制备好的样品垫、金标垫、NC膜以及吸水垫裁剪为宽度相同的长方形，依次进行重叠组装，并设置加样孔，组装成检测西马特罗的检测卡。

4.如权利要求3所述的一种适用动物源性食品的西马特罗胶体金快速检测卡的制备方法，其特征在于，所述的金标垫制备过程中加入0.2M K₂CO₃的量为2.0µL/mL。

5.如权利要求3所述的一种适用动物源性食品的西马特罗胶体金快速检测卡的制备方法，其特征在于，所述的金标垫制备过程中加入抗体原液的量为1.0µL。

6.如权利要求3所述的一种适用动物源性食品的西马特罗胶体金快速检测卡的制备方法，其特征在于，所述T液，用用制备获得的人工西马特罗抗体进行50倍稀释的溶液。

7.如权利要求3所述的一种适用动物源性食品的西马特罗胶体金快速检测卡的制备方法，其特征在于，所述C液，用用PC-2羊抗鼠稀释250倍获得的溶液。

8.如权利要求1一种适用动物源性食品的西马特罗胶体金快速检测卡的应用，具体包括以下步骤：

（1）样品处理：将待固态检样品于均质器中均质1min，10000rpm；称取5.0±0.05g匀浆好的组织样本至10mL聚苯乙烯离心管中，扣上管盖，不宜太紧；放入80℃水浴锅中水浴10min后取出冷却至室温，待检；液态待检样品用干燥、洁净的离心管或适当容器采集50mL左右，如果不立即检测，在2-8℃冷藏可保存24小时，注意避免腐败造成失效或污染；

（2）检测：使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温，从原包装袋中取出检测卡，将检测卡平放，用滴管吸取待检样品溶液，垂直滴加3滴于加样孔中，加样后开始计时3-5分钟观察T线及C线的出现情况；

（3）检测结果：检测卡中C线出现代表结果有效；检测卡中T线及未出现代表则表示样品中西马特罗浓度高于0.01ppb；检测卡中T线与C线同时出现，说明待检样品中不含有西马特罗或其浓度低于0.01ppb，纸条中C线未出现，代表结果无效。