[发明专利]适用于动物源性食品的西马特罗胶体金快速检测卡及其制备方法

说明书

本发明旨在提供一种适用动物源性食品的西马特罗胶体金快速检测卡及其制备方法。制备获得的西马特罗胶体金快速检测卡具有灵敏度高、特异性强、稳定性高、操作简单、便于携带等特点，不需要复杂的仪器设备和专业的技术人员，其分析结果易于判断，短时间内可直接用肉眼观察到检测结果，广泛适用于快速食品检测等现场检测分析，在西马特罗监测领域具有广泛的实用性和开发价值。

技术领域

本发明主要涉及免疫检测的技术领域，具体地说，本发明涉及一种西马特罗胶体金快速检测卡及其制备方法的技术领域。

背景技术

西马特罗(cimaterol，CIM)又名喜马特罗、塞曼特罗，是美国氰胺公司产品，属β2型兴奋剂，研究比较广泛，是继莱克多巴胺、克伦特罗和沙丁胺醇之后的新一代β-肾上腺素受体类激动剂。较大剂量地使用西马特罗，还可以减少胴体的脂肪含量，提高瘦肉率，促进家畜生长、达到改善肉质的效果，因此被作为饲料添加剂非法用于动物源性食品生产中。而长期使用会造成西马特罗在可食性动物组织内蓄积残留，引起食用者中毒。特别是对冠心病高血压患者、老年人容易产生危害，严重的甚至有生命危险。1990年前后欧美等发达国家相继全面禁止使用β-兴奋剂类促生长药物。中华人民共和国农业部公告第193号文件规定西马特罗同克伦特罗、沙丁胺醇等一起被列入禁用清单，禁止在畜禽生产和食品动物中添加。

目前，国内外检测莱克多巴胺和西马特罗的方法主要有。在食品安全检测中，往往先用ELISA进行初筛后，再对阳性样本用HPLC 或GC-MS、LC-MS进行确证。但是上述方法所用的仪器设备昂贵复杂、成本高，同时需要对操作人员进行特殊培训，且实验结果不能立即显示，因此不适用于商检、防疫、畜牧生产者对怀疑对象的快速在线检测和监控。

西马特罗作为新型“瘦肉精”物质，检测手段滞后，尤其是快速检测产品缺乏，目前已建立的检测西马特罗的方法有高压液相色谱法 (HPLC)、液相色谱一质谱联用法(LC-MS)、超高效液相色谱一串联质谱分析方法(μPLC-MS/MS)、气相色谱一质谱联用法(GC-MS)、高效毛细管区带电泳法(CZE)、酶联免疫吸附法(ELISA)等。这些方法操作需要对操作人员进行特殊培训，且实验结果不能立即显示，因此不适用于商检生产者对怀疑对象的快速在线检测和监控。因此急需适合批量、快速筛选的快速检测方法，以满足政府和企业的检测需要。

胶体金检测卡是以胶体金作为免疫层析的指示物，其原理是以条状纤维层析材料为固相，通过毛细作用使样品溶液在层析条上泳动，并同时使样品中的待测物与层析材料上针对待测物的受体(如抗体或抗原)发生高特异高亲和性的免疫反应，层析过程中免疫复合物被富集或截留在层析材料的一定区域(检测带)，通过直接运用可目测的胶体金标记物而得到直观的实验结果。

发明内容

针对目前国内对于西马特罗的检测尚无灵敏度高、特异性强、稳定性高、操作简单、便于携带的检测方法的技术问题，本发明旨在提供西马特罗胶体金快速检测卡及其制备方法，通过制备西马特罗单克隆抗体，制备检测西马特罗的检测卡，获得一种西马特罗胶体金快速检测卡，该检测卡灵敏度高、特异性强、稳定性高、操作简单、便于携带，在西马特罗监测领域具有广泛的实用性和开发价值。

本发明通过以下技术方案实现的：

本发明提供一种适用动物源性食品的西马特罗胶体金快速检测卡，包括含有胶体金标记的西马特罗单克隆抗体溶液喷涂的金标垫、绘有T线和C线的NC膜、样品垫以及吸水垫，进行组装。其中，T 线使用1μL/mL人工制备的西马特罗单克隆抗体T液进行绘制，C线使用250倍稀释的PC-2羊抗鼠的C液绘制。

本发明中，所述一种适用动物源性食品的西马特罗胶体金快速检测卡的具体制备过程为：