[发明专利]一种灵芝菌丝体的培养方法及其应用

权利要求书

1.一种灵芝菌丝体的培养方法，其特征在于，包含以下步骤：

(1)摇瓶扩大培养：将灵芝菌种接种到斜面培养基上，进行斜面培养；将经过斜面培养的灵芝菌种接种到摇瓶培养基中，进行一级摇瓶培养；将经过一级摇瓶培养灵芝菌种的接种到摇瓶培养基中进行二级摇瓶培养，所得灵芝菌种为生产摇瓶二级种；

(2)种子罐扩大培养：步骤(1)中培养的生产摇瓶二级种接入发酵培养基中，进行扩大培养，得到一级灵芝菌种；

(3)发酵罐扩大培养：将步骤(2)得到的一级灵芝菌种接入装有发酵培养基的发酵罐中进行发酵罐培养，过滤，得灵芝菌丝体。

2.根据权利要求1所述的灵芝菌丝体的培养方法，其特征在于，步骤(1)中，所述斜面培养为在将接种有灵芝菌种的斜面培养基在18-22℃条件下暗培养5-8d，待斜面长满菌丝体。

3.根据权利要求2所述的灵芝菌丝体的培养方法，其特征在于，步骤(1)中，所述斜面培养基由以下质量百分含量的组分组成：5-8％玉米粉、2-2.5％葡萄糖、1.5-2％蛋白胨、3-4％小麦粉、0.2-0.4％豆粕、3-4％酵母膏、2-3％琼脂、0.6-0.8％维生素B₁、0.15-0.2％K₂HPO₄、0.1-0.2％MgSO₄以及0.02-0.04％消泡剂，余量为水。

4.根据权利要求1所述的灵芝菌丝体的培养方法，其特征在于，步骤(1)中，所述一级摇瓶培养条件为接入经过斜面培养的灵芝菌种1.5-2cm²，通气量控制为1：0.3-0.4v/v.min，以100-140rpm转速，在28-30℃条件下，振荡培养5-8d。

5.根据权利要求1所述的灵芝菌丝体的培养方法，其特征在于步骤(1)中，所述二级摇瓶培养为将经过一级摇瓶培养的灵芝菌种与摇瓶培养基的体积比为10-15％的接种量接种到摇瓶培养基中，通气量控制为1：0.3-0.4v/v.min，以150-200rpm转速，在20-30℃条件下，培养5-8d。

6.根据权利要求1所述的灵芝菌丝体的培养方法，其特征在于步骤(2)中，所述扩大培养为生产摇瓶二级种与发酵培养基的体积比为10-16％的接种量接种于发酵培养基中，控制罐温25-27℃，搅拌速度100-150rpm，通气量1:0.4-0.8v/v.min，发酵培养4-6d。

7.一种由权利要求1-6任一所述的培养方法培养的灵芝菌丝体。

8.根据权利要求7所述的灵芝菌丝体在饮料中的应用。

9.根据权利要求8所述的灵芝菌丝体在饮料中的应用，其特征在于，所述应用具体方法为：

(1)将权利要求1所制得的灵芝菌丝体，酶解，得灵芝菌丝体酶解滤液；

(2)金针菇汁:将金针菇烘干、粉碎、过筛后，加入质量百分数为0.7-1％纤维素酶溶液中，在50-60℃条件下酶解2-4h，溶液pH为6-6.5，金针菇与纤维素酶溶液料液比为1:10-15g/ml；

(3)将步骤(1)中得到的灵芝菌丝体酶解滤液与步骤(2)中得到的金针菇汁制备成灵芝饮品；所述灵芝饮品由以下质量百分含量的组分组成：35-40％灵芝菌丝体酶解滤液、5-6％鲜柚浓缩汁、4-6％金针菇汁、1-2％蜂蜜、0.01-0.015％山梨酸钾、0.3-0.4％柠檬酸、0.03-0.04％柠檬酸钠、0.03-0.04％果胶、0.05-0.06％黄原胶、0.02-0.03％食盐，余量为水。

10.一种灵芝饮品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1a)将灵芝菌丝体酶解滤液与金针菇汁进行均质研磨，均质为采用二级均质工艺，将料液预热至60-65℃，20-35MPa下均质处理10-15min，随后在15-18MPa均质压力下均质5-10min；

(1b)将步骤(1a)中得到的混合料在100℃下杀菌10min；

(1c)先将食盐食盐用少量软水溶解过滤，然后加入步骤(1b)制得的混合液、溶化的果胶及黄原胶、柠檬酸、柠檬酸钠、鲜柚浓缩汁、蜂蜜、山梨酸钾搅拌均匀，最后补水至配方规定的量；

(1d)将定容后的料液加热至沸，趁热加灌入已灭菌的饮料瓶、压盖后105℃下杀菌10min、冷却后得灵芝菌丝发酵饮品。