[发明专利]一种蝴蝶兰脱毒苗培养繁殖方法

说明书

本发明涉及蝴蝶兰种苗繁育技术领域，具体涉及一种蝴蝶兰脱毒苗培养繁殖方法，具体包括以下步骤：选取健壮、带病毒的蝴蝶兰植株，消毒后用壳聚糖溶液浸泡，再进行初代培养，挑选出初代培养获得的病毒阴性丛生芽进行继代培养，最后选择继代培养后获得的长势好的小苗继续进行壮苗培养、生根培养和移栽。本发明提供的蝴蝶兰脱毒苗培养繁殖方法，获得的蝴蝶兰苗株品质好、脱毒率高且长势健壮，实现蝴蝶兰的无病毒栽培。

技术领域

本发明涉及蝴蝶兰种苗繁育技术领域，具体涉及一种蝴蝶兰脱毒苗培养繁殖方法。

背景技术

蝴蝶兰为兰科蝴蝶兰属，原产于亚热带雨林地区，为附生性兰花。蝴蝶兰白色粗大的气根露在叶片周围，除了具有吸收空气中养分的作用外，还有生长和光合作用。新春时节，蝴蝶兰植株从叶腋中抽出长长的花梗，并且开出形如蝴蝶飞舞般的花朵，深受花迷们的青睐，素有“洋兰王后”之称。

蝴蝶兰是单茎性气生兰，侧枝发育非常少，因此很难常规进行分株繁殖，而且很少形成种子，种子发育也比较困难，基本上在自然条件下萌发的难度比较大，因此蝴蝶兰新品种的培育方法基本上都是经过杂交得来，大部分品种都带病毒，有记录显示，截至目前，至少有28种病毒曾经感染兰科植物。据调查，中国兰科植物感染的病毒以东亚兰嵌纹病毒(Cymbidiummosaicvirus,简称CyMV)、齿舌兰轮斑病毒(Odontoglossumringspotvirus,简称ORSV)这两种病毒复合感染为多数。病毒传播严重制约了兰花产业化发展，病毒可造成植株叶斑、坏死以及花朵变色、畸形等症状，严重影响其品质，目前尚无确切的药物能有效防治病毒的危害与传播，因此繁殖蝴蝶兰无毒苗是产业化发展的必经之路，但是其他兰花品种的方法又不能直接运用到蝴蝶兰身上，因此需要独立开发一种针对蝴蝶兰培养无毒苗的方法。

发明内容

本发明提供一种蝴蝶兰脱毒苗培养繁殖方法，使培养后的蝴蝶兰苗株品质好、脱毒率高且长势健壮，实现蝴蝶兰的无病毒栽培。

为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种蝴蝶兰脱毒苗培养繁殖方法，包括以下步骤：

(1)材料选取

选用生长健壮、经检测后携带病毒的蝴蝶兰植株，除去叶片留取茎；

(2)材料消毒

将步骤(1)中留取的蝴蝶兰茎用水冲洗后，用质量分数为70％的酒精溶液浸泡，再用质量分数为1.0％次氯酸钠溶液消毒10-30分钟后，用无菌水冲洗；最后用质量分数为0.1％升汞溶液浸泡5-15min，用无菌水冲洗；所述0.1％升汞溶液中加入吐温，使升汞溶液中吐温的质量分数为0.08％-0.12％；

(3)材料预处理

将消毒后的蝴蝶兰茎浸泡在1-2g/L壳聚糖溶液中20-30min；

(4)初代培养

将步骤(3)中处理过的蝴蝶兰茎切取茎尖，切取大小为0.2-1mm，留取1个叶原基；接种于初代培养基上培养，培养温度24-26℃，先暗培养2周，再置于光照为1500-5000LX的环境下培养2个月，光照时间为10-16h/日，待两片真叶展开形成丛生芽；所述初代培养基组分为：1/3MS+3.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+0.3mg/L GA3+15g/L蔗糖+100mL/L椰汁+4.5-5.5g/L琼脂+0.1g/L VC+20mg/L PVP，pH为5.4-5.8；

(5)继代培养