[发明专利]一种用于造血干细胞体外扩增的培养体系及方法在审
| 申请号： | 201910443860.5 | 申请日： | 2019-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN110157669A | 公开（公告）日： | 2019-08-23 |
| 发明（设计）人： | 袁雅红;李东升 | 申请（专利权）人： | 湖北爱济莱斯生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0789 | 分类号： | C12N5/0789 |
| 代理公司： | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 | 代理人： | 郑自群 |
| 地址： | 430040 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新二*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 培养体系 间充质干细胞 条件培养基 造血干细胞 细胞因子 扩增 外扩 增高 造血 基础培养基 造血细胞 干性 体外 分化 | ||
1.一种用于造血干细胞体外扩增的培养体系，其特征在于：所述培养体系包括基础培养基、间充质干细胞条件培养基和细胞因子组合。
2.根据权利要求1所述的用于造血干细胞体外扩增的培养体系，其特征在于：所述基础培养基为含10％FBS的IMDM。
3.根据权利要求1所述的用于造血干细胞体外扩增的培养体系，其特征在于：所述细胞因子组合的浓度为SCF 50ng/mL、TPO 25ng/mL、IL-6 20ng/mL和FLT3 50ng/mL。
4.根据权利要求1所述的用于造血干细胞体外扩增的培养体系，其特征在于：所述间充质干细胞条件培养基为总培养体系体积的50％。
5.根据权利要求1所述的用于造血干细胞体外扩增的培养体系，其特征在于：所述间充质干细胞条件培养基通过如下方法制备所得：
(1)将间充质干细胞用含10％FBS的α-MEM培养基重悬，以5×104/mL的密度接种到T25培养瓶中；
(2)待细胞融合达到70％-80％时，更换培养液为无血清培养液；继续培养48小时，收集培养液，用0.22微米过滤器过滤除菌，-20℃冻存备用，得间充质干细胞条件培养基。
6.根据权利要求5所述的用于造血干细胞体外扩增的培养体系，其特征在于：所述间充质干细胞为脐带、胎盘、脂肪、骨髓来源的间充质干细胞的任意一种。
7.一种用于造血干细胞体外扩增的培养方法，其特征在于：将新鲜分离的CD34+HSCs接种到孔板中，然后加入权利要求1-5任一项所述的培养体系中进行培养。
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