[发明专利]纳米金标记与液质联用定量人血清中的转铁蛋白的方法在审
| 申请号： | 201910445050.3 | 申请日： | 2019-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN110286184A | 公开（公告）日： | 2019-09-27 |
| 发明（设计）人： | 冯流星;韩亚琛;熊金平 | 申请（专利权）人： | 中国计量科学研究院 |
| 主分类号： | G01N30/72 | 分类号： | G01N30/72;G01N33/532 |
| 代理公司： | 沈阳杰克知识产权代理有限公司 21207 | 代理人： | 靳玲 |
| 地址： | 100029 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 纳米金标记 转铁蛋白 人血清 铁蛋白 电感耦合等离子质谱 高效液相色谱 生物检测技术 液相色谱质谱 超灵敏检测 纳米金颗粒 人血清蛋白 人血清样品 定量检测 高效分离 联用技术 生物样品 液质联用 标志物 低丰度 血清 制备 回收率 检测 应用 成功 | ||
1.纳米金标记与液质联用定量人血清中的转铁蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)纳米金颗粒的制备；
(2)纳米金标记血清中的转铁蛋白；
(3)HPLC-ICP-MS测量血清中转铁蛋白。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，将氯金酸溶液加热至沸腾，然后将柠檬酸钠溶液快速加入烧瓶中，继续搅拌加热30-40分钟，溶液颜色由浅黄色变为鲜红色，之后在室温下继续搅拌20-30分钟冷却，得纳米金颗粒。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，氯金酸与柠檬酸钠的质量比为1～3.8：1。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，将制备的纳米金颗粒离心，弃去上清液，重悬于硼酸缓冲液或磷酸缓冲液中。然后将缓冲液中，加入去除白蛋白的血清蛋白，加入的血清蛋白与离心纯化后的纳米金颗粒在37℃下避光孵育2-3h。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的硼酸缓冲液或磷酸缓冲液的pH为6.8～7.8，优选为磷酸缓冲液，pH为6.8。
6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的去除白蛋白的血清蛋白为用ProteoExtractTM白蛋白去除试剂盒除去白蛋白的血清蛋白，去除白蛋白后的人血清样品与AuNP间的加入比例为加入比例为1：10-1：200(V：V)，优选为1：10-1：40。
7.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的纳米金颗粒的离心速率为：8000-10000rpm，离心时间为：20-30min。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，HPLC和ICP-MS的参数如下：
9.权利要求1-8何一项所述的方法在定量人血清中的转铁蛋白中的应用。
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