[发明专利]脱酰胺基麦胶蛋白多肽重组抗原、重组抗原表达基因、重组表达载体及其制备方法和应用有效
申请号: | 201910445910.3 | 申请日: | 2019-05-27 |
公开(公告)号: | CN110128549B | 公开(公告)日: | 2021-07-06 |
发明(设计)人: | 郑亮;罗春雷;钱纯亘;胡鹍辉 | 申请(专利权)人: | 深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;G01N33/68 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 林青中;易皎鹤 |
地址: | 518116 广东省深圳市龙*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 胺基 蛋白 多肽 重组 抗原 表达 基因 载体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种脱酰胺基麦胶蛋白多肽重组抗原,其特征在于,由白介素15蛋白和分别连接于所述白介素15蛋白两端的DGP-1肽段和DGP-2肽段组成,所述DGP-1肽段连接于所述白介素15蛋白的N端,所述DGP-2肽段连接于所述白介素15蛋白的C端,所述DGP-1肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述DGP-2肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述白介素15蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.根据权利要求1所述的脱酰胺基麦胶蛋白多肽重组抗原,其特征在于,所述脱酰胺基麦胶蛋白多肽重组抗原还与六聚组氨酸标签和Flag标签连接,所述白介素15蛋白和分别连接于所述白介素15蛋白两端的DGP-1肽段和DGP-2肽段构成融合蛋白,所述六聚组氨酸标签和所述Flag标签分别连接于所述融合蛋白的两端。
3.根据权利要求2所述的脱酰胺基麦胶蛋白多肽重组抗原,其特征在于,所述六聚组氨酸标签、DGP-1肽段、白介素15蛋白、DGP-2肽段和Flag标签依次通过连接肽连接。
4.一种核酸分子,其特征在于,其编码权利要求1~3任一项所述的脱酰胺基麦胶蛋白多肽重组抗原。
5.一种脱酰胺基麦胶蛋白重组表达载体,其特征在于,包括权利要求4所述的核酸分子和表达载体。
6.根据权利要求5所述的脱酰胺基麦胶蛋白重组表达载体,其特征在于,所述表达载体为pET-21a(+)、pET-28a(+)或pET-30a(+)。
7.如权利要求1~3中任一项所述的脱酰胺基麦胶蛋白多肽重组抗原、权利要求4所述的核酸分子或权利要求5~6中任一项所述的脱酰胺基麦胶蛋白重组表达载体在制备用于诊断乳糜泻的产品中的应用。
8.一种乳糜泻诊断试剂盒,其特征在于,包括权利要求1~3任一项所述的脱酰胺基麦胶蛋白多肽重组抗原。
9.根据权利要求8所述的乳糜泻诊断试剂盒,其特征在于,还包括磁微球,所述脱酰胺基麦胶蛋白多肽重组抗原与所述磁微球偶联,所述磁微球带有氨基基团。
10.一种权利要求1~3任一项所述的脱酰胺基麦胶蛋白多肽重组抗原的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:获得编码所述脱酰胺基麦胶蛋白多肽重组抗原的核酸分子,并进行双酶切和连接以插入到表达载体中得到重组表达载体,将所述重组表达载体转入宿主进行表达,然后将表达产物分离、纯化,得到所述脱酰胺基麦胶蛋白多肽重组抗原。
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