[发明专利]一种检测高毒力鲍曼不动杆菌的试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.鲍曼不动杆菌内一段特异性序列作为标志物在制备检测高毒力鲍曼不动杆菌的试剂盒中的应用，所述特异性序列存在于鲍曼不动杆菌内一段包括19个开放读码框的基因序列中；

所述包括19个开放读码框的基因序列如SEQ ID NO.1所示；

所述特异性序列如SEQ ID NO.2所示。

2.一种如权利要求1中所述的检测高毒力鲍曼不动杆菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中的PCR扩增体系包括PCR反应液、用于扩增特异性序列SEQ ID NO.2的引物、阳性对照及阴性对照；

所述用于扩增特异性序列SEQ ID NO.2的引物包括上游引物和下游引物，其中，

所述上游引物序列为：5’-TTGAGAAGCTAAATTATGGCTCG-3’，

所述下游引物序列为：5’-GATAGCACAGAAATCCATAAAGGAA-3’。

3.根据权利要求2所述的检测高毒力鲍曼不动杆菌的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液包括Taq聚合酶、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐溶液、氯化镁溶液、氯化钾溶液、曲拉通溶液、甲酰胺溶液以及脱氧核糖核苷三磷酸。

4.根据权利要求3所述的检测高毒力鲍曼不动杆菌的试剂盒，其特征在于，所述PCR扩增体系为20µL，其中，Taq聚合酶浓度为5U/uL、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐溶液浓度为200mmol/L、氯化镁溶液浓度为20mmol/L、氯化钾溶液浓度为500mmol/L、曲拉通溶液体积比为0.2%、甲酰胺溶液体积比为10%以及脱氧核糖核苷三磷酸浓度为10mmol/L。

5.根据权利要求2所述的检测高毒力鲍曼不动杆菌的试剂盒，其特征在于，所述PCR扩增体系为20µL，其中，所述上游引物及下游引物浓度均为0.5umol/L。

6.根据权利要求2所述的检测高毒力鲍曼不动杆菌的试剂盒，其特征在于，所述阳性对照为经全基因组测序确定含有特异性序列SEQ ID NO.2且动物实验呈高致死率的临床鲍曼不动杆菌菌株核酸；所述阴性对照为经全基因组测序确定不含有特异性序列SEQ ID NO.2且动物实验呈非致死性的临床鲍曼不动杆菌菌株核酸。