[发明专利]一种海洋真菌来源的萘并吡喃酮类化合物、制备方法及其应用

说明书

本发明涉及一种海洋真菌来源的萘并吡喃酮类化合物、制备方法及其应用，所述萘并吡喃酮化合物具有化合物1‑3所示的结构：

技术领域

本发明属于海洋真菌次级代谢产物领域，具体涉及一种海洋真菌来源的萘并吡喃酮类化合物、制备方法及其应用。

背景技术

萘并吡喃酮骨架结构是真菌次级代谢产物中一类重要化合物，其表现出多种生物活性，例如细胞毒、酶抑制等。本发明提供一种利用海洋真菌Penicillium sp.HK1-22制备得到系列萘并吡喃酮化合物及其二聚体，并对其进行了抗耐药致病菌及抗真菌活性测试。

发明内容

本发明所述海洋真菌Penicillium sp.HK1-22的菌种保藏信息：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2018年6月11日；保藏编号：CGMCC No.15865；分类命名：青霉Penicillium sp.。

本发明提供一种萘并吡喃酮化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于所述萘并吡喃酮化合物具有化合物1-3所示的结构：

本发明的另一实施方案提供一种由海洋真菌Penicillium sp.HK1-22制备化合物1-5的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)先在菌种培养基中对海洋真菌Penicillium sp.HK1-22进行菌种培养；

(2)再在发酵培养基中对步骤(1)中的海洋真菌Penicillium sp.HK1-22进行发酵培养；

(3)将步骤(2)发酵培养后得到的发酵物中的发酵液和菌体分离，发酵液用有机溶剂A萃取2～4次，合并萃取液后减压浓缩得到发酵液浸膏；菌体用有机溶剂B浸提2～4次，合并浸提液后减压浓缩得到菌体浸膏；合并发酵液浸膏和菌体浸膏，经色谱分离和/或重结晶得到化合物1-5；

化合物1-5的结构如下：

本发明制备方法中涉及洗脱剂、流动相等比例的均指体积比；所述色谱分离为本领域常规的色谱分离技术，优选正相硅胶柱层析、反向硅胶柱层析、LH-20凝胶柱层析、高效液相HPLC制备中的一种或几种结合；所述重结晶为本领域常规的重结晶技术。

其中所述菌种培养基中含有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、琼脂、粗海盐、水，发酵培养基中含有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、粗海盐、水。

本发明上述制备方法中，所述的有机溶剂A优选乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿或乙醚中的一种或几种；所述的有机溶剂B优选甲醇、乙醇、THF或丙酮中的一种或几种。

本发明上述制备方法中菌种培养基优选含有葡萄糖0.1％-10.0％、酵母膏0.01％-5％、蛋白胨0.01％-5％、琼脂0.1％-6.0％、粗海盐0.05％-10％，适量的水；进一步优选含有葡萄糖0.1％-5.0％、酵母膏0.01％-2％、蛋白胨0.01％-2％、琼脂0.1％-3.0％、粗海盐0.05％-5％；上述百分比均为重量百分比；培养温度优选为0-45℃，进一步优选5-30℃，更进一步优选15-25℃；培养时间优选为2-10天，进一步优选为3、5、7天。发酵培养基优选含有葡萄糖0.1％-10.0％、酵母膏0.01％-5％、蛋白胨0.01％-5％、粗海盐0.05％-10％，适量的水；进一步优选含有葡萄糖0.1％-5.0％、酵母膏0.01％-2％、蛋白胨0.01％-2％、粗海盐0.05％-5％；上述百分比均为重量百分比；培养温度优选为0-45℃，进一步优选5-30℃，更进一步优选10-25℃；培养时间优选为20-40天，进一步优选21、24、28、30、32、35天。