[发明专利]一种UPLC-MS/MS检测降脂宁颗粒中有效成分含量的方法

说明书

本发明公开了一种UPLC‑MS/MS检测降脂宁颗粒中有效成分含量的方法，所述有效成分为金丝桃苷、二苯乙烯苷、荷叶碱和橙黄决明素中的一种或两种以上，用C18色谱柱，流动相是0.05%甲酸水和0.05%甲酸乙腈，电喷雾质谱ESI离子源，正离子扫描，多反应监测模式。对该方法的线性范围，精密度，稳定性以及加标回收率进行了考察：四种有效成分的线性范围分别是：10‑2000ng/ml、15‑3000ng/ml、10‑2000ng/ml、10‑2000ng/ml，且r分别为：0.9989、0.9991、0.9936、0.9991。该方法简便高效，能够同时快速测定药物中的四种有效成分的含量。

技术领域

本发明属于药物检测领域，具体涉及一种UPLC-MS/MS检测降脂宁颗粒中有效成分含量的方法。

背景技术

随着目前人们生活水平的日益提升，高脂血症也开始逐渐呈现出了低龄化、高发病率的趋势，药物治疗也在不断地进行更深层的研究，但是有些西药经过临床实验表明在治疗疾病时具有肝脏毒性，这就使得药物容易对患者产生不良反应。而中药复方制剂的副作用就相对较少、更加的安全，进而在临床应用更易于被患者接受。故本文将降脂宁颗粒作为降脂类的复方制剂的研究对象展开研究。

降脂宁颗粒是由山楂(去核)、决明子、荷叶、制首乌等四味中草药构成的中草药复方制剂，收录在《部颁标准中药成方制剂第十三册》，能够起到降低血脂的作用，因而临床主要用在治疗抗心律不齐和高脂血症。有文献记载该药物的主要有效成分为山楂中的金丝桃苷，又名槲皮素-3-O-β-D吡喃半乳糖苷，具有抗肝损伤、抗炎症和抗血栓的作用，制首乌中的有效物质为二苯乙烯苷，具有有益于肝肾、降低血脂的药理作用，荷叶中的荷叶碱能起到抗氧化、抗动脉粥样硬化，而决明子中的橙黄决明素能够促进肠道的蠕动，减少胆固醇在肠道的停留。这四种有效成分对于高血脂症均有一定的作用，同时还能起到保护肝脏的功效。

目前常用的有关含量测定的检测方案也有很多比如：潘林梅等采用HPLC法测定降脂通脉片中的2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷的含量研究。王东艳等采用的双波长HPLC法同时测定降脂宁片中4中活性成分的含量以及刘燕等采用薄层扫描法测定丹田降脂丸中丹参素的含量。但HPLC法易因干扰较大，灵敏度低，检测时间较长，所需要的样品的量也比较多。薄层色谱法存在着定量时准确度不高、存在人为误差的缺点。而UPLC-MS/MS法则是将液相的强大的分离性和质谱的结构测定性能联系了起来，为复杂成分的中草药成分的分析及其含量测定提供了更加高效、简便的分析方法，因UPLC-MS/MS所特有的高通量、高灵敏度、不易受到干扰物的影响而成为目前常用的用于微量残留成分检测的技术手段，能够在较短的时间对于多组分进行一次性的检测。

发明内容

本发明的目的在于提供一种UPLC-MS/MS检测降脂宁颗粒中有效成分含量的方法。

基于上述目的，本发明采取如下技术方案：

一种UPLC-MS/MS检测降脂宁颗粒中有效成分含量的方法，所述有效成分为金丝桃苷、二苯乙烯苷、荷叶碱和橙黄决明素中的一种或两种以上，检测过程包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：分别取待测成分的标准品，以75v％的甲醇为溶剂，配制对照品溶液，使对照品溶液中有效成分的浓度分别为金丝桃苷2μg/mL，二苯乙烯苷3μg/mL，荷叶碱2μg/mL，橙黄决明素2μg/mL；

(2)供试品溶液的制备：

称取降脂宁颗粒，研制成粉末状，精密称取100.0mg转移到20mL的棕色样品瓶中，再加入75v％的甲醇5mL，准确称其质量，随后超声5min，冷却，再用75v％甲醇补足减少的重量，静置10-20min，随后用0.45μm的微孔滤膜进行过滤，滤液即为供试品溶液；

(3)标准曲线的绘制：