[发明专利]一种超临界流体提取鸡骨香根提取物及其方法、应用

说明书

本发明属于药物提取技术领域，具体涉及一种超临界流体提取鸡骨香根提取物及其方法、应用。该鸡骨香提取物，命名为化合物J‑1，具体结构式为：。本发明提取的化合物药物原料易得，易于产业化，可以根据需要制备成不同的剂型，具有巨大的社会效益。本发明提取的化合物，纯度高，且抗肿瘤活性高，具有抗增殖和诱导细胞凋亡的作用，具有作为抗癌疗法候选物的潜力。

技术领域

本发明属于药物提取技术领域，具体涉及一种超临界流体提取鸡骨香根提取物及其方法、应用。

背景技术

巴豆属是大戟科，在全球拥有超过1300种，是广泛分布于热带和亚热带地区的一个大属。中国大约生长有21种巴豆属植物，其中一些长期以来被用于缓解痛经和中医治疗消化不良和疟疾。巴豆属的植物以其多种萜类化合物而闻名，具有广泛的生物活性。此外，还获得了生物碱，黄烷酮，木脂素，多酚化合物，苯基丁酸和肽。

Croton crassifolius Geisel是巴豆属的一种，主要分布于中国南部和东南亚其他地区。作为一种名为“鸡骨香”的中药材，其根已被用于治疗癌症，胃痛，喉咙痛和风湿病。现有的植物化学研究表明，C. crassifolius中的主要植物化学物质是萜类化合物，包括倍半萜，二萜和三萜。二萜被认为是C. crassifolius中的主要和特征化合物，具有各种生物活性，如抗病毒和抗血管生成活性。

目前，关于C. crassifolius的大多数研究都关注其根提取物在医学中的应用，并且很少研究其低极性部分的利用。现有技术中，据报道该草药的低极性部分含有丰富的活性化合物，但是具体的研究较少。尚未有本发明化合物提取的相关记载。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种超临界流体提取鸡骨香根提取物，该提取物具有高的抗肿瘤活性，具有抗增殖和诱导细胞凋亡的作用。

本发明还提供了一种超临界流体提取鸡骨香根提取物的提取方法。

本发明另一目的在于提供了一种上述鸡骨香根提取物的应用。

本发明为了实现上述目的所采用的技术方案为：

一种超临界流体提取鸡骨香根提取物，所述提取物的结构式如下：

本发明还提供了一种超临界流体提取鸡骨香根提取物的方法，包括以下步骤：

（1）取鸡骨香干燥根，粉碎，过40目筛，称取样品，装入超临界CO₂流体萃取仪的反应釜中，首先静态提取，接着动态提取，以甲醇为夹带剂 ，获得深黄色浸膏，将浸膏用温水冲散，以二氯甲烷充分萃取，得萃取物；

（2）配制洗脱剂，极性梯度为石油醚/丙酮 (50:1~1:2)，每个比例洗脱5.0 L，将萃取物经薄层色谱分析，选择石油醚-丙酮分离体系，用100-200目硅胶干法装柱，进行粗分；薄层色谱检测合并，获得5个组分A1～A5；

（3）将A4用200-300目硅胶细分；配制石油醚-乙酸乙酯体系洗脱液进行梯度洗脱，极性梯度为8:1-5:1，将薄层色谱检测合并为6个部分A4a-A4f；A4f部分先经Sephadex LH-20柱层析，以二氯甲烷-甲醇反复洗脱，取中间段经C18柱并65-85% CH₃OH/H₂O (2 mL/min,20 min)梯度洗脱，紫外检测器210 nm处检测，将14.600 min馏分浓缩后继续以55% CH₃CN/H₂O (2 mL/min)等度洗脱，获得鸡骨香提取物，命名为化合物J-1。

进一步的，所述静态提取为在压力25 MPa，温度35 ℃条件下提取30 min。

进一步的，所述动态提取时，CO₂流速5.0 L/min，以甲醇为夹带剂，甲醇的流速为5.4 mL/min。