[发明专利]硫酸化可德兰多糖的应用在审
申请号: | 201910461242.3 | 申请日: | 2019-05-30 |
公开(公告)号: | CN110215515A | 公开(公告)日: | 2019-09-10 |
发明(设计)人: | 李平利;王凤山;金毅明;张舒 | 申请(专利权)人: | 山东大学齐鲁医院 |
主分类号: | A61K39/39 | 分类号: | A61K39/39;A61K39/00;A61P37/04;A61P35/00 |
代理公司: | 济南克雷姆专利代理事务所(普通合伙) 37279 | 代理人: | 张祥明 |
地址: | 250012 山东省济南市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 可德兰多糖 硫酸化 树突状细胞疫苗 应用 小鼠 佐剂 肿瘤细胞裂解物 杀伤肿瘤细胞 树突状细胞 抗原递呈 理论基础 临床肝癌 免疫疗法 免疫治疗 模型小鼠 能力增强 疫苗佐剂 治疗策略 肿瘤组织 高表达 树突状 活化 体外 致敏 接种 疫苗 体内 研究 | ||
1.硫酸化可德兰多糖作为树突状细胞疫苗佐剂的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,硫酸化可德兰多糖在树突状细胞疫苗中的浓度为100μg/mL。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,硫酸化可德兰多糖的重均分子量为30.66kDa,硫含量为14.32%,其结构式如下所示:
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述硫酸化可德兰多糖的制备方法如下:将干燥的可德兰多糖溶于DMSO中,搅拌加热至65℃,加入三氧化硫-吡啶粉末,反应1小时;待反应结束后,冷却至室温,加入含质量浓度5%醋酸钠的甲醇溶液,待白色沉淀析出后,经离心收集滤液;采用截留分子量为3kDa的超滤膜进行超滤浓缩,收集超滤液,经冷冻干燥后即得;其中,可德兰多糖、DMSO、三氧化硫-吡啶粉末、含5%醋酸钠的甲醇溶液的质量体积比为1g:100mL:2.5g:500mL;化学反应式如下:
5.一种树突状细胞疫苗,包含佐剂,其特征在于,所述佐剂为硫酸化可德兰多糖。
6.根据权利要求5所述的一种树突状细胞疫苗,其特征在于,所述佐剂在树突状细胞疫苗中的浓度为100μg/mL。
7.根据权利要求5所述的一种树突状细胞疫苗,其特征在于,硫酸化可德兰多糖的重均分子量为30.66kDa,硫含量为14.32%,其结构式如下所示:
8.根据权利要求7所述的一种树突状细胞疫苗,其特征在于,所述硫酸化可德兰多糖的制备方法如下:将干燥的可德兰多糖溶于DMSO中,搅拌加热至65℃,加入三氧化硫-吡啶粉末,反应1小时;待反应结束后,冷却至室温,加入含质量浓度5%醋酸钠的甲醇溶液,待白色沉淀析出后,经离心收集滤液;采用截留分子量为3kDa的超滤膜进行超滤浓缩,收集超滤液,经冷冻干燥后即得;其中,可德兰多糖、DMSO、三氧化硫-吡啶粉末、含5%醋酸钠的甲醇溶液的质量体积比为1g:100mL:2.5g:500mL;化学反应式如下:
9.权利要求5~8中任一项所述一种树突状细胞疫苗的制备方法,其特征在于,具体步骤是:体外培养BALB/c小鼠骨髓来源树突状细胞、BALB/c小鼠肝癌细胞系H22细胞裂解物与硫酸化可德兰多糖,共同培养24h,之后1500r/min离心5min,收集细胞沉淀,加入PBS重悬,细胞密度为5×105/mL,即得所述树突状细胞疫苗;其中,所述细胞裂解物的浓度为25μg/mL。
10.权利要求5~8中任一项所述一种树突状细胞疫苗作为肝癌免疫治疗药物的应用。
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