[发明专利]一种蜗牛酶液的制备方法及其产品和应用

说明书

本发明涉及一种蜗牛酶液的制备方法，所述制备方法的具体步骤为先将蜗牛内脏物加入5‑10倍体积的柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液匀浆，离心收集上清液；再将上清液加饱和硫酸铵进行初次沉淀，弃上清后，沉淀加PBS溶解后；再按体积百分比计算加至50％饱和度硫酸铵进行二次沉淀，沉淀加PBS溶解后脱盐即可得蜗牛酶液。还可以进一步将蜗牛酶液冷冻干燥以备长期保存使用。由本发明提供的蜗牛酶液的制备方法，工艺简单，条件温和，可以充分利用蜗牛肉加工产业的副产物，进一步提高资源的再利用，为蜗牛的综合利用开辟了一条新途径。

技术领域

本发明属于生物制品技术领域，涉及一种蜗牛酶液的制备方法及其产品和应用。

背景技术

抗菌化合物是一类具有抗菌作用的活性物质。细菌感染曾经严重威胁着人类的生存和发展。以弗莱明发现青霉素为开端,人们开始不断从微生物次级代谢产物中找到众多有效的抗菌活性物质并开发出半合成抗生素。从微生物体内可以提取许多种类的抗菌物质，它成为获得抗菌物质的主要来源。此外，抗菌物质还可以来源于植物，动物等。植物在自然界生活和生长发育过程中，常受到病原菌的侵染。植物可通过体内的抗病基因的表达所产生的抗菌物质,即其次生代谢的产物来抵抗病原菌的侵害。植物抗菌化合物又可分为组成性抗菌化合物和诱导性抗菌化合物,它们具有杀虫、杀菌、除草、杀驱鼠以及调节生物生长和发育等活性,如乙蒜素、苦参碱、柠檬醛、植保素等。而动物及其附属物的抗菌物质的研究为天然产物的开发利用展示了其广阔的应用前景。特别是鱼精蛋白、柞蚕抗菌肤、及卵黄免疫球蛋白、蜂胶、壳聚糖和溶菌酶等种来源于动物的天然抗菌物质可作为制备药物、化妆品或保健品中的成分。

蜗牛属于软体动物门，腹足纲，有很多种类可以食用，如法国蜗牛、庭园蜗牛和玛瑙蜗牛等。它来源简单，繁殖较快，饲养方便，以摄取富含纤维素的植物性材料为主，可将纤维素水解产生的葡萄糖作为生长发育的能源物质。蜗牛肉除以高蛋白、低脂肪、不含胆固醇、肉质细腻、味道鲜嫩可口外，蜗牛消化腺中含有二十余种酶,具有应用价值的主要有纤维素酶、果胶酶、α-淀粉酶、1,4-β-D甘露糖内切酶、β-D葡萄糖水解酶、α-甘露糖苷酶、甘露糖醇氧化酶、氨基酸转移酶和胆碱脂酶,其中以纤维素酶(10％)、果胶酶(10％)、α-淀粉酶(8％)最多。蜗牛酶是很有价值的一种酶，它可以用于酵母cell壁的破碎,广泛用于细胞生物学和基因工程学的研究,也可作为饲料添加剂,从而提高饲料的消化率；它也可用作果汁澄清,桔子脱束衣,果酱制作等。目前我国蜗牛养殖业和蜗牛肉的加工业发展很快,而大部分蜗牛内脏作为废物被扔去。在不影响蜗牛食用的情况下，如何充分利用蜗牛的内脏废弃物，提取蜗牛酶及其他蛋白物质，既利于蜗牛的综合利用，增加效益，又利于环保。研究如何将其具有丰富资源内脏废弃物中提取抗菌活性物质具有重要的应用前景。

蚯蚓含有大量的蛋白质和脂肪，营养价值很高，是优良的蛋白质饲料和食品。从蚯蚓中提取的活性成分(如蚓激酶和抗菌肽等)已被开发成药，具溶血栓、抗凝血、抗肿瘤、抑菌等作用。利用蚯蚓体腔液处理蔬菜可达到控病的效果并获得绿色环保的食物。蚯蚓可将土壤中污染物处理后达到无公害。因此，集药材、饲料、食品和去污防污等经济和环保价值的蚯蚓，极具开发前景。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种高效抑制多种菌的蜗牛酶液的制备方法，还提供制备方法得到的产品，进一步提供该产品在制备药物、化妆品或保健品中的应用。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1.一种蜗牛酶液的制备方法，所述制备方法的步骤为：

a.将蜗牛内脏物加入5-10倍体积的柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液匀浆，再离心收集上清液A；

b.将上清液A加80％饱和度硫酸铵进行初次沉淀，弃上清后，沉淀加PBS溶解，得初级浓缩液B；

c.再在初级浓缩液B中按体积百分比计算加至50％饱和度硫酸铵再次沉淀，沉淀加PBS溶解后脱盐得蜗牛酶液。