[发明专利]一种以猪肠道菌群为靶标的发酵豆粕活性度体内外评价方法

权利要求书

1.一种以猪肠道菌群为靶标的发酵豆粕活性度体内外评价方法，其特征在于，包括：通过检测发酵豆粕对动物肠道菌群正向或者负向调节作用以及动物小肠绒毛的特征来评价发酵豆粕活性度。

2.根据权利要求1所述的以猪肠道菌群为靶标的发酵豆粕活性度体内外评价方法，其特征在于：所述动物小肠绒毛的特征包括：动物小肠绒毛的长度，以及动物小肠绒毛的腺窝深度。

3.根据权利要求2所述的以猪肠道菌群为靶标的发酵豆粕活性度体内外评价方法，其特征在于：所述动物小肠绒毛的长度越长以及所述动物小肠绒毛的腺窝深度越深，所述发酵豆粕活性度越高。

4.根据权利要求2所述的以猪肠道菌群为靶标的发酵豆粕活性度体内外评价方法，其特征在于：所述动物小肠绒毛的特征的测评步骤包括：

(1)猪源菌群小鼠模型的建立：以4周龄无菌小鼠作为试验小鼠饲养于无菌隔离室中，室温21±2℃，湿度40％～70％，按照12h明暗转换，所述试验小鼠所用垫料及食用食物均经过无菌处理；采集猪场中健康猪群的新鲜粪便制成粪便悬液，取0.3mL的所述粪便悬液灌胃每只所述试验小鼠，3d后进行第二次灌胃，灌胃量为0.3mL，一周后采用强制排便的方式，采集所述试验小鼠的粪便，若粪便中含有菌群即可认为所述试验小鼠成为猪源菌群小鼠；

(2)动物试验：向所述猪源菌群小鼠喂食基础日粮或添加有所述发酵豆粕的基础日粮，自由采食饮水，四周后收集所述猪源菌群小鼠的新鲜粪便，并将所述猪源菌群小鼠杀死，采取所述猪源菌群小鼠的小肠段，至于无菌环境中，观察所述猪源菌群小鼠小肠绒毛的长度和腺窝深度。

5.根据权利要求3所述的以猪肠道菌群为靶标的发酵豆粕活性度体内外评价方法，其特征在于：所述正向调节作用的表现为在动物肠道中有益菌群丰度及均匀度提升，所述负向调节作用的表现为在动物肠道中致病菌群丰度及均匀度提升。

6.根据权利要求5所述的以猪肠道菌群为靶标的发酵豆粕活性度体内外评价方法，其特征在于：所述有益菌群包括双歧杆菌、乳杆菌、芽孢杆菌、梭菌等；所述致病菌群包括沙门氏菌、大肠杆菌。

7.根据权利要求5所述的以猪肠道菌群为靶标的发酵豆粕活性度体内外评价方法，其特征在于：所述丰度及均匀度的检测包括：采用微生物平板计数法或16S rDNA高通量测序法对动物肠道中的微生物数量进行检测。

8.根据权利要求7所述的以猪肠道菌群为靶标的发酵豆粕活性度体内外评价方法，其特征在于：所述16S rDNA高通量测序法包括：1)基因组DNA提取；2)高可变区域引物设计和PCR扩增；3)测序文库建立；4)上机测序；5)结果分析。

9.根据权利要求5所述的以猪肠道菌群为靶标的发酵豆粕活性度体内外评价方法，其特征在于：所述有益菌群所占比例越大，所述发酵豆粕活性度越高；所述有益菌群所占比例就越小，所述发酵豆粕活性度越低。