[发明专利]比率型硫化氢荧光探针及其制备方法和其在水质硫化物检测中的应用以及硫化氢检测方法

说明书

本发明公开了一种比率型硫化氢荧光探针及其制备方法和其在水质硫化物检测中的应用以及硫化氢检测方法。该比率型硫化氢荧光探针其结构式如式IV所示：式IV中的R为氢基。该比率型硫化氢荧光探针具有合成方法简单、荧光量子产率高，比率计量型特点明显等优点。该荧光探针被成功应用于水质硫化物检测，具有良好的水质硫化物检测性能，并取得了较好的检测效果。

技术领域

本发明涉及分析检测技术领域，特别涉及一种比率型硫化氢荧光探针及其制备方法和其在水质硫化物检测中的应用以及硫化氢检测方法。

背景技术

水中硫化物包括溶解性的H₂S、HS^-、S^2-、有机类硫化物等，其存在对农作物生长、水生生物的生存造成严重威胁，被称为“水产养殖第一杀手”。更重要的是水质中硫化物不稳定，容易受周围环境的影响，尤其是酸性条件下释放出来的有毒气体H₂S，达到一定浓度，对人体伤害极大。因此，进行水质硫化物高效、实时检测具有重要意义。

目前水质硫化物检测方法主要包括亚甲基蓝分光光度法、碘量法、离子电极法、重金属沉淀比色法等，其中亚甲基蓝分光光度法(GB/T16489-1996水质硫化物的测定)，于1996-08-01发布，1997-01-01实施，是目前应用最多的检测方法。同时海洋行业、城镇建设行业、水产养殖业等针对不同浓度的水质硫化物检测都有各自的行业标准。但是这些众多的检测技术或者检测方法存在着外界抗干扰能力差、检测灵敏度不高等问题，测量数据的置信度和可比性缺乏统一的标准。随着最新的水质硫化物安全浓度数据的出台，尤其是在水产养殖、饮用水等领域，目前的水质硫化物检测方法已经无法满足需求。因此亟需发展新一代具有行业普适性的水质硫化氢高效检测技术。荧光检测技术具有操作简单，可实现原位检测以及可视化等优点，已经发展成为生物体内微量硫化氢检测的重要手段。本发明即是在此背景下，我们设计合成了一种新的比率型硫化氢荧光探针。

发明内容

有鉴于此，本发明提出一种比率型硫化氢荧光探针；

本发明还提出一种比率型硫化氢荧光探针的制备方法；

本发明还提出一种比率型硫化氢荧光探针在水质硫化物检测中的应用；

本发明还提出一种基于比率型硫化氢荧光探针的硫化氢检测方法。

本发明的技术方案是：

本发明提供一种式IV所示的一种新型比率型硫化氢荧光探针：

式IV中R为氢基。

本发明还提供了一种比率型硫化氢荧光探针的制备方法。如图1所示，所述制备方法为：将化合物I，苯乙炔，双三苯基磷二氯化钯，碘化亚铜，三乙胺按照一定的比例加入到四氢呋喃溶液中，50℃搅拌反应6h，反应液纯化得到化合物II，所述化合物I，苯乙炔，双三苯基磷二氯化钯，碘化亚铜，三乙胺按照摩尔比的比例为0.5～1:2:2:3：3，优选为1:2:2:2:3；将化合物II，氢氧化钾按照一定比例加入到甲醇溶液中，65℃反应8h，反应液经过纯化得到化合物III，所述化合物II，氢氧化钾按照摩尔比的比例为0.5～1.5:4，优选为1:3；将化合物III，叠氮三甲基硅烷，亚硝酸叔丁酯按照一定的比例加入到乙腈溶液中，一定温度下反应20h，将反应液纯化得到目标化合物IV，所述化合物III，叠氮三甲基硅烷，亚硝酸叔丁酯按照摩尔比的比例为0.5～1.5:2:3，优选为1:2:3，所述温度为0℃～100℃，优选35℃～45℃。

本发明还提供了一种硫化氢检测方法：将比率型硫化氢荧光探针配置成10mM的母液，然后取所述母液1μL加入到一定体积的溶剂里，稀释成为0μM-50μM的不同浓度的荧光探针检测液；将待检硫化氢样品水溶液加入到所述荧光探针检测液中，根据不同浓度的硫化氢与荧光探针反应产生的荧光强度的不同从而被荧光检测器捕捉，从而得到样品浓度。