[发明专利]一种Ⅰ群11d型禽腺病毒株、灭活疫苗及其制备方法

说明书

本发明公开了一种Ⅰ群11d型禽腺病毒株、灭活疫苗及其制备方法。所述的Ⅰ群11d型禽腺病毒株，命名为禽腺病毒RC18，该病毒株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17404。实验证明，本发明分离得到的I群11d型禽腺病毒RC18株毒价高，增殖能力强，免疫原性好，与流行株匹配，将其制备成灭活疫苗免疫实验鸡后能抵御临床流行的I群禽腺病毒(血清11d型)对鸡群的感染，免疫应答产生迅速，攻毒保护率高，并且未出现由疫苗引起的任何局部和全身不良反应，安全性高，稳定性好。本发明的提出为鸡包涵体肝炎的防治提供了一种有效技术手段。

技术领域

本发明涉及一种病毒毒株及灭活疫苗，具体涉及一种Ⅰ群11d型禽腺病毒株、灭活疫苗及其制备方法，属于兽用生物制品技术领域。

背景技术

鸡包涵体肝炎(Inclusion body hepatitis，IBH)是因I群禽腺病毒(FAdV)引起的传染病，是目前流行的、急性、高度接触性的一种鸡传染病，在我国部分地区流行。其病原为禽腺病毒(Fowl adenovirus，FAdV)血清8b型，在病毒分类上为腺病毒科，禽腺病毒属中的Ⅰ亚群禽腺病毒。

FAdV属于禽腺病毒科(Family Adenoviridae)禽腺病毒属的无囊膜双股DNA病毒，可分为12个血清型，这些血清型之间表现出非常不同的病原性。在世界范围内，禽腺病毒2、3、8a、8b、9和11血清型可引起包涵体肝炎，在血清4型存在情况下，会引起心包积液肝炎综合征。目前在我国已知危害国内养鸡业的主要血清型是4型、8型、11型。该病原可导致7d～20W鸡发病，主要感染1-3周龄的肉鸡、817杂交肉鸡、麻鸡、黄鸡，3～7w多发。病鸡生长受阻、羽毛蓬乱、蹲伏。

目前在我国山东、河南、河北等多个地区发生此病，该病既可以垂直传播，能够进行蛋传(egg transmission)，种鸡群受到感染后一直无症状，但蛋传给后代雏鸡而引发严重病症，从而能够对肉鸡产业造成损害，同时也可水平传播。鸡感染后可成为终身携带者，并可间歇性排毒。鸡群发病后会突现3～7天的死亡高峰。可能至10％，个别可达30％。有时病程也可持续2-3w。，单独感染也能够导致高发病率和死亡率。

在诊断方面，目前主要通过实验室的临床症状、组织病理变化、PCR扩增和病毒分离等方法进行确诊。

在疫病防控方面，应用鸡胚和禽源细胞培养禽腺病毒可以为禽腺病毒疫苗的研究提供一定的材料，但因不同血清型禽腺病毒之间无交叉保护性，已有的毒株血清型对市场流行的毒株不能提供良好保护，因此，目前市场亟需开发一种新血清型禽腺病毒疫苗来弥补市场禽腺病毒疫苗防控不全面的情况。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种Ⅰ群11d型禽腺病毒株，以便为研制I群禽腺病毒灭活疫苗奠定基础。

本发明中，提供的Ⅰ群11d型禽腺病毒株，命名为禽腺病毒RC18，分类命名为禽腺病毒D种血清11型(Adenovirus sp.)，该病毒株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC NO.17404，保藏时间为2019年3月21日。该病毒由发病鸡病料组织接种SPF鸡胚分离所得。所述病毒为禽腺病毒Ⅰ亚群中的D种，血清型为11型，病毒核酸为双股DNA，无囊膜；病毒颗粒直径为70～90nm，呈20面体对称结构。在氯化铯中浮密度为1.32～1.37g/ml；病毒对脂溶剂如乙醚、氯仿、脱氧胆酸钠、胰蛋白酶、2％酚、50％乙醇等具有抵抗力，同时耐受pH3～9，但在1：1000的甲醛中可被灭活。病毒的增殖也可被DNA抑制剂IuDR和BuDR所抑制；病毒对热具有较强的抵抗力，在60℃30min仍具有活力；病毒不能凝集鸡、鸭、火鸡及大鼠红细胞；该病毒可经7日龄鸡胚绒毛尿囊膜途径培养，也可以在鸡肝癌细胞(LMH细胞)上增殖。

本发明的目的之二是提供一种所述的Ⅰ群11d型禽腺病毒株在制备I群禽腺病毒灭活疫苗中的用途。