[发明专利]一种工业化提取卵转铁蛋白的方法及其蛋白铁产品

权利要求书

1.一种工业化提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)蛋清的预处理：

将鸡蛋清洗干净后分离出蛋清，采用电动搅拌器缓慢搅拌蛋清至浓厚蛋白变均匀；

(2)高压脉冲电场处理：

将(1)中蛋清进行高压脉冲电场处理，电场分子极化作用诱导更多带电极性基团暴露，诱导带电分子产生反复剧烈运动，破坏了卵黏蛋白纤维状结构，使卵黏蛋白与卵类黏蛋白、溶菌酶可溶性蛋白质形成的复合物解体，浓厚蛋白稀薄化，粘度进一步降低，分子分散；

(3)加入FeSO₄或FeCl₂溶液进行鳌合：

将搅拌均匀的蛋清加双蒸水进行等体积稀释后，加入NaHCO₃和NaCl充分溶解后加入FeSO₄或FeCl₂溶液进行充分鳌合；

(4)初次加入无水乙醇：

缓慢加入无水乙醇至终浓度30％～50％后立即离心取上清液，并用纱布将上清液中悬浮的杂质滤过；

(5)二次加入无水乙醇：

将(4)中的上清液中缓慢加入无水乙醇至终浓度52％～66％后静置于4℃冰箱后进行离心取沉淀并充分溶解；

(6)抽滤：

抽滤装置连接真空泵进行抽滤(5)中的溶液；

(7)两次超滤：

将抽滤后的溶液进行两次超滤，不断加水进行浓缩，除去乙醇、盐分、未与卵转铁蛋白鳌合的多余的亚铁离子以及分子量小于卵转铁蛋白的部分杂蛋白；

(8)真空冷冻干燥：

将浓缩后的卵转铁蛋白溶液装入冻干盒并放入-20℃冰箱先进行预冻后，再放入冻干机冻干，冷冻干燥的条件为温度-50℃，真空度0.1Pa，时间为36h；

(9)回收乙醇：

步骤(7)中小于超滤膜分子量一端的液体采用旋转蒸发仪进行悬蒸回收乙醇，旋转蒸发仪的参数设定为压力1Mpa，温度40～45℃；

(10)粉碎：

用粉碎机将冻干的蛋白打碎成细粉后过筛，过筛目数为100目。

2.根据权利要求1所述的一种工业化提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的缓慢搅拌的转速为300～400r/min，时间10～15min。

3.根据权利要求1所述的一种工业化提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的高压脉冲电场处理条件为场强20～30kv/cm，脉冲数为6～10，时间5～10min。

4.根据权利要求1所述的一种工业化提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于：步骤(3)中所述加入的NaHCO₃和NaCl终浓度分别为20mmol/L、50mmol/L，配制50mmol/L的FeSO₄或FeCl₂溶液加入量为每100mL稀释的蛋清液中加入0.8～1.2mL，搅拌转速为200～300r/min，时间20～30min。

5.根据权利要求1所述的一种工业化提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于：步骤(4)所述缓慢加入无水乙醇是边加边搅拌，转速500～600r/min，至终浓度为40％～45％，离心条件为离心力3000×g，离心时间20min。

6.根据权利要求1所述的一种工业化提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于：步骤(5)所述上清液中加入的无水乙醇是至终浓度为54％～58％，边加边搅拌的条件是300～400r/min，静置时间为6～7h，离心条件为离心力3000×g，离心时间20min。

7.根据权利要求1所述的一种工业化提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于：步骤(6)抽滤先安装滤纸进行初步除杂后分别选用微米级的水系膜5um、1.2um、0.2um依次过滤溶解的沉淀溶液，抽滤的真空泵压力调为0.8～1Mpa。