[发明专利]Herbicidin生物合成基因簇及其应用有效
申请号: | 201910471680.8 | 申请日: | 2019-05-31 |
公开(公告)号: | CN110157724B | 公开(公告)日: | 2021-02-09 |
发明(设计)人: | 洪斌;解云英;侍媛媛;谷仁杰;李怡宏;王新位;任卫聪;李星星;王丽非;张丛 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院医药生物技术研究所 |
主分类号: | C12N15/76 | 分类号: | C12N15/76;C12P17/18;C07D519/00;A61K31/52;A61P31/10;A61P35/00 |
代理公司: | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人: | 范盈 |
地址: | 100050*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | herbicidin 生物 合成 基因 及其 应用 | ||
1.一种提高herbicidin F发酵产量的方法,所述方法为:在发酵生产herbicidin F的宿主菌株中过表达HcdR2基因,
所述的宿主菌株为S.mobaraensisUS-43菌株;
所述的HcdR2为LuxR蛋白家族的转录调节蛋白,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示。
2.发酵生产herbicidin F的方法,所述方法为:
(1)在宿主菌株中过表达所述HcdR2基因;
(2)发酵生产所述宿主菌株;
(3)分离herbicidinF;
所述的宿主菌株为S.mobaraensis US-43菌株;
所述的HcdR2为LuxR蛋白家族的转录调节蛋白,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,
步骤(2)所述的发酵生产所述宿主菌株的方法为:采用二级液体发酵方法,发酵培养基为:0.3%高氮玉米浆干粉,2%黄豆饼粉,2.5%葡萄糖,2%淀粉,2%麦芽糖,0.2%K2HPO4,0.3%NaCl。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的二级液体发酵参数为:
宿主菌株的孢子接种于种子发酵液中,28℃,220rpm培养48小时;
种子发酵液接种于液体发酵培养基当中,液体发酵培养基于28℃,220rpm培养7天。
5.根据权利要求2-4任一所述的方法,其特征在于,
步骤(3)所述的分离为:发酵液的上清液由C18色谱层析柱富集,分别用50%和100%甲醇溶液洗脱。
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