[发明专利]一种检测水稻上井冈霉素残留的方法

说明书

本发明提供一种检测水稻上井冈霉素残留的方法，包括如下步骤：S1：样品处理：直接量取田水样品溶液；称取一定量的植株、稻壳、土壤或糙米样品，置于离心管中，加水浸润后超声处理，再加入甲醇回旋震荡提取，然后离心处理后吸取上层清液，重复上述步骤1‑3次，合并上层清液得到样品溶液；S2：样品溶液浓缩：各样品溶液利用层析柱进行吸附收集，洗脱液利用旋转蒸发仪浓缩；S3：检测：田水样品的浓缩液过滤处理后，利用高效液相色谱进行检测；植株、稻壳、土壤和糙米的样品浓缩液经过滤处理后，利用液相色谱质谱联用进行检测。本发明的准确度高、精密度好、检测限低，回收率达到100±30％，符合农药残留量分析与检测的技术要求。

技术领域

本发明属于农药残留分析技术领域，具体涉及一种检测水稻上井冈霉素残留的方法。

背景技术

井冈霉素是由水链霉菌井冈变种产生的水溶性抗生素，其有效成分为A、B、C、D、E、F共6种组分，其中井冈霉素A是其主要的有效成分，一般也是以井冈霉素A的含量来表示产品的规格和质量。井冈霉素是我国独立自主研发的生物源杀菌剂，主要用于防治水稻纹枯病，具有强内吸性，兼具保护和治疗的作用，是我国南方水稻区用于防治水稻纹枯病的主要药剂品种。目前，对于一些难以在作物中提取的目标农药，用通用的方法往往无法排除基质干扰或者达不到很好的提取效果，也就导致相应的检测效果大打折扣，无法实现准确的测定。而且井冈霉素A是氨基糖苷类化合物，分子中含有多个极性基团，难于气化，不能直接进行气相色谱分析，而一般对水稻上井冈霉素残留仅是通过土壤、田水、植株、糙米或稻壳等单一基质进行检测，最终检测结果的准确性和代表性存在一定偏差。因此，急需一种能够解决现有问题的检测水稻上井冈霉素残留的方法。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种检测水稻上井冈霉素残留的方法。

本发明提供了如下的技术方案：

一种检测水稻上井冈霉素残留的方法，包括如下步骤：

S1：样品处理

田水样品的处理：直接量取田水样品溶液；

植株、稻壳样品的处理：称取2.5g植株样品或稻壳样品，置于50mL离心管中，加入15mL水浸润后超声60min，再加入10mL甲醇回旋震荡提取60min，然后再在转速4000r/min下，离心处理5min后吸取上层清液，重复上述步骤1-3次，合并上层清液得到植株或稻壳的样品溶液；

土壤、糙米的处理：称取5g土壤样品或糙米样品，置于50mL离心管中，然后加入15mL水浸润后超声60min，再加入10mL甲醇回旋震荡提取60min，然后再在转速4000r/min下，离心处理5min后，吸取上层清液，重复上述步骤1-3次，合并上层清液得到土壤或糙米的样品溶液；

S2：样品溶液浓缩

样品溶液的浓缩：将各样品溶液调节pH值为2-3，然后利用层析柱进行吸附收集，依次用pH3.5磷酸盐缓冲溶液和乙醇淋洗去除杂质，再用洗脱剂进行洗脱，所得洗脱液利用旋转蒸发仪浓缩近干，再用氮气或空气吹干，定量加入2mL的pH7.0磷酸氢二钠-磷酸氢钾缓冲溶液，超声溶解得到各样品浓缩液；

S3：检测

田水的样品浓缩液利用0.22μm亲水性PTFE滤膜过滤后，利用高效液相色谱进行检测；植株、稻壳、土壤或糙米的样品浓缩液也利用0.22μm亲水性PTFE滤膜过滤后，利用液相色谱质谱联用进行检测。

优选的，田水的样品浓缩液利用高效液相色谱按照下述液相色谱条件进行检测：岛津LC-20AT液相色谱仪，配紫外检测器(UVD)；色谱柱：ODS-SP(4.6×250mm 5μm)；流动相：甲醇和pH7.0的5mmol/L磷酸氢二钠-磷酸缓冲溶液的体积比为2:98；流速：0.7mL/min；检测波长：210nm；进样量：20μL。