[发明专利]一种促进山羊毛囊干细胞增殖的方法有效
| 申请号： | 201910474606.1 | 申请日： | 2019-06-03 |
| 公开（公告）号： | CN110157736B | 公开（公告）日： | 2021-06-04 |
| 发明（设计）人： | 李拥军;王强;尹修远;瞿静雯 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C12N15/861 | 分类号： | C12N15/861 |
| 代理公司： | 扬州苏中专利事务所(普通合伙) 32222 | 代理人： | 沈志海 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 促进 山羊 毛囊 干细胞 增殖 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种促进山羊毛囊干细胞增殖的方法，其特征在于，构建CMTM3基因的干扰表达载体pDC316-ZsGreen-shRNA-CMTM3，将该载体导入山羊毛囊干细胞，通过降低毛囊干细胞中CMTM3基因的表达水平，从而促进山羊毛囊干细胞的增殖；所述载体为阳性重组载体，其获得过程如下：
山羊毛囊干细胞总RNA提取，再反转录获得cDNA，针对CMTM3设计3个干扰靶点，合成后的引物退火形成双链DNA后与双酶切线性化的pDC316-ZsGreen-shRNA载体连接形成重组质粒pDC316-ZsGreen-shRNA-CMTM3，将连接好的重组质粒转化到TOP10感受态细胞中，经测序选择阳性菌株并大量抽提重组质粒，最后经过腺病毒包装、扩增和纯化、细胞转染，最后进行荧光定量PCR以判断干扰效果，毛囊干细胞转染干扰载体后做细胞活力检测、细胞周期检测、细胞凋亡检测，以判断对毛囊干细胞增殖的影响。
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