[发明专利]微流控芯片及外泌体提取方法在审
申请号: | 201910478837.X | 申请日: | 2019-06-04 |
公开(公告)号: | CN110079457A | 公开(公告)日: | 2019-08-02 |
发明(设计)人: | 杨浩;宣光辉;程亮 | 申请(专利权)人: | 苏州大学 |
主分类号: | C12M1/42 | 分类号: | C12M1/42;C12M1/00 |
代理公司: | 宁波高新区核心力专利代理事务所(普通合伙) 33273 | 代理人: | 袁丽花 |
地址: | 215000 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 微流控芯片 微流通道层 样本出口 样本入口 磁腔 基底 自动化 混合通道 剂量需求 物理损害 携带方便 体积小 磁盘 提纯 连通 样本 芯片 室内 | ||
1.一种微流控芯片,其特征在于,所述微流控芯片包括基底及位于基底上的微流通道层,所述微流通道层设有样本入口、样本出口、及连通于样本入口和样本出口之间的若干混合通道及磁腔室,所述磁腔室内设有磁盘。
2.根据权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述样本入口包括第一样本入口、第二样本入口及第三样本入口,第一样本入口、第二样本入口及第三样本入口分别与混合通道及磁腔室相连通。
3.根据权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述微流通道层包括依次设置的第一混合通道、第一磁腔室、第二混合通道、第二磁腔室、第三混合通道、第三磁腔室,所述第一混合通道与样本入口相连通,第三磁腔室与样本出口相连通,第一混合通道、第二混合通道及第三混合通道为S形嵌入式障碍混合通道。
4.根据权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述基底为玻璃基底,微流通道层为PDMS微流通道层。
5.一种基于微流控芯片的外泌体提取方法,其特征在于,所述方法包括:
S1、在样本入口中通入血清和免疫磁珠悬浮液,在混合通道内混合反应得到捕获到外泌体的免疫磁珠,并富集于磁腔室内的磁盘上;
S2、在样本入口中通入缓冲液,冲洗混合通道内的杂质,而后在混合通道内通过缓冲液清洗捕获到外泌体的免疫磁珠,并富集于磁腔室内的磁盘上;
S3、在样本入口中通入洗脱液,在混合通道内混合反应,通过洗脱液分离免疫磁珠与外泌体,分离后的免疫磁珠富集于磁腔室内的磁盘上,于样本出口中提取纯化后的外泌体。
6.根据权利要求5所述的外泌体提取方法,其特征在于,所述方法具体为:
S1、在第一样本入口和第二样本入口中分别通入血清和免疫磁珠悬浮液,在第一混合通道内混合反应得到捕获到外泌体的免疫磁珠,并富集于第一磁腔室内的磁盘上;
S2、在第三样本入口中通入缓冲液,冲洗混合通道内的杂质,而后释放第一磁腔室内的磁盘,在第二混合通道内通过缓冲液清洗捕获到外泌体的免疫磁珠,并富集于第二磁腔室内的磁盘上;
S3、在第三样本入口中通入洗脱液,释放第二磁腔室内的磁盘,在第三混合通道内混合反应,通过洗脱液分离免疫磁珠与外泌体,分离后的免疫磁珠富集于第三磁腔室内的磁盘上,于样本出口中提取纯化后的外泌体。
7.根据权利要求6所述的外泌体提取方法,其特征在于,所述步骤S1中,血清和免疫磁珠悬浮液的通入流速为4~6μl/min,通入时间为20~40min。
8.根据权利要求6所述的外泌体提取方法,其特征在于,所述步骤S2中,“冲洗混合通道内的杂质”过程中缓冲液的通入流速为5~15μl/min,通入时间为5~15min;“清洗捕获到外泌体的免疫磁珠”过程中缓冲液的通入流速为5~15μl/min,通入时间为5~15min。
9.根据权利要求6所述的外泌体提取方法,其特征在于,所述步骤S3中,洗脱液的通入流速为1~10μl/min,通入时间为5~15min。
10.根据权利要求5所述的外泌体提取方法,其特征在于,所述步骤S2中的缓冲液为磷酸缓冲盐溶液。
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