[发明专利]微流控芯片及外泌体提取方法

说明书

本发明公开了一种微流控芯片及外泌体提取方法，所述微流控芯片包括基底及位于基底上的微流通道层，所述微流通道层设有样本入口、样本出口、及连通于样本入口和样本出口之间的若干混合通道及磁腔室，所述磁腔室内设有磁盘。本发明能够连续、自动化、高效地提纯外泌体，样本剂量需求少、芯片体积小，携带方便；微流控芯片提取外泌体的自动化程度高、分离时间短、效率高，提过过程中对外泌体造成的物理损害大大减少。

技术领域

本发明涉及微流控技术领域，特别是涉及一种微流控芯片及外泌体提取方法。

背景技术

外泌体是直径为30nm-150nm的纳米级细胞外囊泡，它可以由体内或者体外培养的细胞分泌，并同时存在于尿液、血清、血浆、乳汁等人体体液中。近年来，外泌体被认为是重要的新兴临床诊疗的生物标志物，可以揭示细胞的生理信息，为临床诊断提供新方法。

现有的外泌体分离方法包括超速离心法、蔗糖密度梯度离心法、商品化试剂盒沉淀法、聚合物沉淀法和免疫亲和法。然而，这些传统的外泌体提取方法都存在着一些问题，比如操作过程繁琐、提取纯度低和提取设备昂贵等。其中超速离心法对设备要求高，实验消耗的样品量较大，同时实验操作时间很长，纯度较低；沉淀法容易被其他共沉淀的物质污染，影响后期实验分析；免疫亲和法不能批量分离外泌体。

因此，针对上述技术问题，有必要提供一种微流控芯片及外泌体提取方法。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种微流控芯片及外泌体提取方法。

为了实现上述目的，本发明一实施例提供的技术方案如下：

一种微流控芯片，所述微流控芯片包括基底及位于基底上的微流通道层，所述微流通道层设有样本入口、样本出口、及连通于样本入口和样本出口之间的若干混合通道及磁腔室，所述磁腔室内设有磁盘。

作为本发明的进一步改进，所述样本入口包括第一样本入口、第二样本入口及第三样本入口，第一样本入口、第二样本入口及第三样本入口分别与混合通道及磁腔室相连通。

作为本发明的进一步改进，所述微流通道层包括依次设置的第一混合通道、第一磁腔室、第二混合通道、第二磁腔室、第三混合通道、第三磁腔室，所述第一混合通道与样本入口相连通，第三磁腔室与样本出口相连通，第一混合通道、第二混合通道及第三混合通道为S形嵌入式障碍混合通道。

作为本发明的进一步改进，所述基底为玻璃基底，微流通道层为PDMS微流通道层。

本发明另一实施例提供的技术方案如下：

一种基于微流控芯片的外泌体提取方法，所述方法包括：

S1、在样本入口中通入血清和免疫磁珠悬浮液，在混合通道内混合反应得到捕获到外泌体的免疫磁珠，并富集于磁腔室内的磁盘上；

S2、在样本入口中通入缓冲液，冲洗混合通道内的杂质，而后在混合通道内通过缓冲液清洗捕获到外泌体的免疫磁珠，并富集于磁腔室内的磁盘上；

S3、在样本入口中通入洗脱液，在混合通道内混合反应，通过洗脱液分离免疫磁珠与外泌体，分离后的免疫磁珠富集于磁腔室内的磁盘上，于样本出口中提取纯化后的外泌体。

作为本发明的进一步改进，所述方法具体为：

S1、在第一样本入口和第二样本入口中分别通入血清和免疫磁珠悬浮液，在第一混合通道内混合反应得到捕获到外泌体的免疫磁珠，并富集于第一磁腔室内的磁盘上；

S2、在第三样本入口中通入缓冲液，冲洗混合通道内的杂质，而后释放第一磁腔室内的磁盘，在第二混合通道内通过缓冲液清洗捕获到外泌体的免疫磁珠，并富集于第二磁腔室内的磁盘上；