[发明专利]一种小麦麸皮红曲霉发酵液的制备方法在审
申请号: | 201910481544.7 | 申请日: | 2019-06-04 |
公开(公告)号: | CN110157627A | 公开(公告)日: | 2019-08-23 |
发明(设计)人: | 陈小举;汪倩;李湘;刘浩;张志蓬 | 申请(专利权)人: | 巢湖学院 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12R1/66 |
代理公司: | 苏州翔远专利代理事务所(普通合伙) 32251 | 代理人: | 王华 |
地址: | 238000 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 小麦麸皮 红曲霉 制备 红曲霉发酵液 蒸汽爆破处理 液体种子培养 超声波钝化 高浓度发酵 复合酶解 预处理液 培养基 研磨 超微粉 酶处理 超细 活化 酶活 | ||
1.一种小麦麸皮红曲霉发酵液的制备方法,其特征在于:包括下列步骤:
步骤1:将小麦麸皮用其质量3-5倍的10-30℃的纯化水浸泡4-7h;然后对浸泡后的小麦麸皮进行蒸汽爆破处理,蒸汽爆破的参数为:蒸汽压强为2.2-2.4Mpa,维压时间为180-220s;
步骤2:将蒸汽爆破后的小麦麸皮沥去表面水分,粉碎至60-80目;然后再用胶体磨,在氮气保护下,研磨至细度为25-50µm,得到小麦麸皮超细浆,备用;
步骤3:将小麦麸皮超细浆与纯化水按质量比1: 4-5的比例混合得到混合液,然后放入酶反应器中,再向酶反应器中添加混合液质量0.25-0.50%的中性蛋白酶、0.25-0.50%的纤维素酶、0.25-0.50%的淀粉酶和0.10-0.25%的脂肪酶,酶解处理3-6h;
步骤4:将酶处理后的混合液置于超声波环境中,超声处理5-8min,然后降温至室温后得到小麦麸皮预处理液;
步骤5:将小麦麸皮粉碎至30~60目,得到小麦麸皮粗粉;将小麦麸皮粗粉采用气流超微粉碎机粉碎至300~400目,得到小麦麸皮超微粉;
步骤6:将红曲霉菌种接种到小麦麸皮-PDA斜面上,30-35℃培养6-8d,得到适应性活化后的红曲霉菌种斜面;
步骤7:向适应性活化后的红曲霉菌种斜面加入无菌水,然后用接种铲将斜面上的孢子刮下,制成菌种悬液;按2.5-5%的接种量将菌种悬液接入灭菌后的液体种子培养基中,在温度30-35℃、转速100-200r/min的摇床中培养4-6d,得到红曲霉液体种子;
步骤8:高浓度发酵培养,共包括4个步骤:第一步,按2.5-5.0%的接种量将红曲霉液体种子接入灭菌后的液体发酵培养基中,在温度30-35℃、搅拌转速100-200r/min、通气量为每小时发酵液体积的50-60倍,培养45-50h;第二步,向发酵罐中添加发酵液质量15-20%的灭菌后的小麦麸皮超微粉,保持温度30-35℃、搅拌转速100-200r/min、通气量为每小时发酵液体积的50-60倍,培养36-48h;第三步,向发酵罐中添加发酵液质量25-30%的灭菌后的小麦麸皮超微粉,保持温度30-35℃、搅拌转速100-200r/min、通气量为每小时发酵液体积的50-60倍,培养36-48h;第四步,向发酵罐中添加发酵液质量15-20%的灭菌后的小麦麸皮超微粉,保持温度30-35℃、搅拌转速100-200r/min、通气量为每小时发酵液体积的50-60倍,培养36-48h,发酵完成后,得到小麦麸皮红曲霉发酵液。
2.根据权利要求1所述的小麦麸皮红曲霉发酵液的制备方法,其特征在于:酶解处理的条件为:pH值为7.0-8.0、温度为53-57℃、转速为20-45r/min。
3.根据权利要求1所述的小麦麸皮红曲霉发酵液的制备方法,其特征在于:所述中性蛋白酶的酶活力为20000-100000U/g;纤维素酶的酶活力为20000-100000U/g;淀粉酶的酶活力为20000-100000U/g;脂肪酶的酶活力为20000-100000U/g。
4.根据权利要求1所述的小麦麸皮红曲霉发酵液的制备方法,其特征在于:小麦麸皮-PDA斜面的制备方法包括:将土豆去皮洗净,切成小块,放在其4-6倍质量的水中煮沸,用纱布过滤,滤液加水稀释至原来的体积;再加其质量1.8-2.2%的葡萄糖、1.8-2.2%的琼脂、20-30%的小麦麸皮预处理液,封装于试管中,121℃饱和蒸汽灭菌15-20min后铺斜面即得。
5.根据权利要求1所述的小麦麸皮红曲霉发酵液的制备方法,其特征在于:液体种子培养基的原料配方包括下列质量百分比的原料:25-50%小麦麸皮预处理液、10-25%小麦麸皮超微粉、2.5-3.5%葡萄糖、2-3%牛肉浸膏、0.6-1%蛋白胨、0.4-0.6%硝酸钠、0.2-0.3%氯化钠、0.08-0.12%硫酸锌、0.08-0.12%硫酸镁,其余为纯化水;制备方法包括:按照原料配方将各原料混合均匀,然后装入摇瓶中,121℃饱和蒸汽灭菌15-20min后放凉至室温,备用。
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