[发明专利]一种复合菌剂及其发酵餐厨垃圾制备有机液体肥料的应用

权利要求书

1.一种复合菌剂，其特征在于所述复合菌剂由如下体积配比的菌悬液组成：OD₆₀₀值0.5～0.8的解脂耶氏酵母菌菌悬液20～30份、OD₆₀₀值0.5～0.8的葡萄牙棒孢酵母菌菌悬液10～20份、OD₆₀₀值0.5～0.8的产朊假丝酵母菌菌悬液15～25份，OD₆₀₀值0.3～0.6的植物乳杆菌菌悬液35～55份；所述解脂耶氏酵母菌为解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)CICC32187；所述葡萄牙棒孢酵母为葡萄牙棒孢酵母(Clavispora lusitaniae)CICC 32908；所述产朊假丝酵母为产朊假丝酵母(Candida utilis)CICC 1768；所述植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CICC 21801。

2.如权利要求1所述复合菌剂，其特征在于所述复合菌剂由如下体积配比的菌悬液组成：OD₆₀₀值0.8的解脂耶氏酵母菌菌悬液25份、OD₆₀₀值0.8的葡萄牙棒孢酵母菌菌悬液15份、OD₆₀₀值0.8的产朊假丝酵母菌菌悬液15份，OD₆₀₀值0.6的植物乳杆菌菌悬液45份。

3.如权利要求1所述复合菌剂，其特征在于所述复合菌剂由如下体积配比的菌悬液组成：OD₆₀₀值0.6的解脂耶氏酵母菌菌悬液20份、OD₆₀₀值0.6的葡萄牙棒孢酵母菌菌悬液15份、OD₆₀₀值0.6的产朊假丝酵母菌菌悬液25份，OD₆₀₀值0.4的植物乳杆菌菌悬液40份。

4.如权利要求1所述复合菌剂，其特征在于所述菌悬液按如下方法制备：

(1)菌种活化：

分别将解脂耶氏酵母，葡萄牙棒孢酵母，产朊假丝酵母接种至YPD固体培养基，30℃条件下培养2天，分别获得各自活化菌体；

将植物乳杆菌接种至MRS固体培养基，35℃条件下培养4天，获得活化的菌体；

YPD液体培养基组成：葡萄糖20g/L，蛋白胨20g/L，酵母粉10g/L，溶剂为去离子水，pH自然；YPD固体培养基是向YPD液体培养基加入琼脂粉15g/L；

MSR液体培养基组成：蛋白胨10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖5g/L，乙酸钠5g/L，柠檬酸二胺2g/L，1g/L Tween 80，K₂HPO₄ 2g/L，MgSO₄·7H₂0 0.2g/L，MnSO₄·H₂O 0.05g/L，CaCO₃ 20g/L，溶剂为去离子水，pH6.8，MSR固体培养基是向MSR液体培养基添加琼脂15g/L；

(2)种子培养：在无菌条件下，将步骤(1)活化的解脂耶氏酵母，葡萄牙棒孢酵母，产朊假丝酵母菌体分别接种至YPD液体培养基，30℃、150r/min摇床培养1天，获得相应的酵母菌种子液；在无菌条件下，将步骤(1)活化的植物乳杆菌接种至MSR液体培养基，35℃条件下培养2天，获得植物乳杆菌种子液；

(3)发酵培养：按体积浓度10％的接种量，分别将步骤(2)各个酵母菌种子液和乳杆菌种子液接种至装有300L发酵培养基的500L发酵罐中；酵母菌发酵罐采用YPD液体培养基作为发酵培养基，在通气、30℃、150r/min条件下发酵培养，发酵液离心，沉淀用无菌水或灭菌的YPD液体培养基配制成OD₆₀₀达到0.5～0.8的菌悬液，获得相应的酵母菌菌悬液；植物乳杆菌采用MSR液体培养基作为发酵培养基，在30℃条件下发酵培养48h至60h，发酵液离心，沉淀用无菌水或灭菌的YPD液体培养基配制成OD₆₀₀达到0.3～0.6的菌悬液，获得植物乳杆菌菌悬液。

5.一种权利要求1所述复合菌剂在发酵餐厨垃圾制备有机液体肥料中的应用。