[发明专利]一种小鼠红细胞悬液的制备方法

说明书

本发明公开了一种小鼠红细胞悬液的制备方法，包括以下步骤：a.采集多只成年小鼠血液各0.2～0.4ml，将小鼠血液与红细胞保存液按照体积比为1:1.5～2.5混合均匀后保存，保存温度为2～8℃；b.向步骤a得到的混合液中加入生理盐水至总体积为15ml且摇匀，在转速为1400～1600rpm下离心4～6min，弃去上清液；c.重复步骤b两次到四次后，再加入生理盐水至总体积为15ml且摇匀，在转速为1400～1600rpm下离心10min，弃去上清液；d.向步骤c中弃去上清液所得的溶液中加入无菌生理盐水制备体积分数为2％的小鼠红细胞悬液然后保存，保存温度为2～8℃；延长小鼠红细胞的有效保存时间。

技术领域

本发明涉及红细胞悬液制备技术领域，特别涉及一种小鼠红细胞悬液的制备方法。

背景技术

红细胞是血液中数量最多的有形成分，起源于骨髓造血干细胞，在红细胞生成素作用下，分化为原红细胞，经数次有丝分裂发育为早幼、中幼和晚幼红细胞。红细胞有交换和携带气体的功能，它的功能是通过红细胞内的血红蛋白来实现，因为血红蛋白中含有铁元素。

小鼠红细胞经常用于各种医学实验中，现有的小鼠红细胞的提取方法也是多种多样的，而这些方法制备得到的小鼠红细胞的有效保存时间短，导致需要经常配制和造成小鼠红细胞的浪费。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术中制备小鼠红细胞的方法得到的小鼠红细胞的有效保存时间短的问题，提供一种小鼠红细胞悬液的制备方法。

本发明采用的技术方案是：

一种小鼠红细胞悬液的制备方法，包括以下步骤：

a.采集多只成年小鼠的血液各0.2～0.4ml，将小鼠血液与红细胞保存液混合均匀后保存，其中，小鼠血液与红细胞保存液的体积比为1:1.5～2.5，保存温度为2～8℃；

b.向步骤a得到的混合液中加入生理盐水至总体积为15ml且摇匀，然后在转速为1400～1600rpm的条件下离心4～6min，弃去上清液；

c.重复步骤b两次到四次后，再加入生理盐水至总体积为15ml且摇匀，然后在转速为1400～1600rpm的条件下离心10min，弃去上清液；

d.向步骤c中弃去上清液所得的溶液中加入无菌生理盐水制备体积分数为2％的小鼠红细胞悬液然后保存，保存温度为2～8℃。

进一步限定，所述红细胞保存液为阿氏液或CPDA-1。

进一步限定，所述阿氏液由以下方法制备得到：称取葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.80g、柠檬酸0.05g以及氯化钠0.42g，混合后加入100ml的试剂瓶中，向试剂瓶中加入蒸馏水至100ml，加热溶化既得所述阿氏液，保存温度为4℃，有效保存时间为180天，其中，加热温度为110～120℃，加热时间为10min。

进一步限定，所述CPDA-1由以下方法制备得到：无水葡萄糖25.5g、枸橼酸钠.2H₂O26.3g、枸橼酸.H₂O 3.27g、磷酸二氢钠2.22g以及腺嘌呤173.0g，混合后加入1000ml的试剂瓶中，向试剂瓶中加入蒸馏水至1000ml，加热溶化既得所述CPDA-1，保存温度为4℃，有效保存时间为180天，其中，加热温度为110～120℃，加热时间为6min。

进一步限定，所述生理盐水由以下方法制备得到：称取氯化钠8.5g且溶于1000ml蒸馏水中即可得到。

进一步限定，小鼠血液与红细胞保存液的体积比为1:2。

进一步限定，步骤b中和步骤C中所述转速为均1500rpm。

进一步限定，步骤c中所述重复步骤b三次。