[发明专利]CRISPR/Cas9系统介导的山羊KRTAP13-1基因敲除的方法在审
| 申请号： | 201910495313.1 | 申请日： | 2019-06-11 |
| 公开（公告）号： | CN110172478A | 公开（公告）日： | 2019-08-27 |
| 发明（设计）人： | 刘东军;高源;郝斐;呼啸;多磊 | 申请（专利权）人： | 内蒙古大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/90;C12N5/10;C12N15/877;A01K67/027 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 010021 内蒙古自*** | 国省代码： | 内蒙古;15 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 山羊 敲除 基因定点 细胞株 构建 介导 胎儿成纤维细胞 筛选标记基因 转基因动物 打靶载体 基因功能 基因敲除 基因序列 遗传育种 共表达 转染 筛选 研究 优化 安全 | ||
1.CRISPR/Cas9系统引导的山羊KRTAP13-1基因定点敲除的方法，其特征在于，其是根据山羊的KRTAP13-1基因序列，构建基于CRISPER/Cas9系统的Cas9/gRNA共表达敲除载体，然后将优化后的Cas9/gRNA共表达敲除载体转染至山羊胎儿成纤维细胞中，获得KRTAP13-1基因定点敲除的细胞株。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，靶位点在KRTAP13-1基因的唯一外显子上。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，sgRNA靶序列为5′-CAGGACCACCTGCGCTACTC-3′。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述山羊包括阿尔巴斯绒山羊。
5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述CRISPER/Cas9系统中Cas9/gRNA共表达载体的序列如SEQ ID NO:1所示。
6.根据权利要求1-5任一项所述方法获得的山羊KRTAP13-1基因定点敲除的细胞株。
7.根据权利要求1-6任一项所述方法在生产KRTAP13-1基因定点敲除的克隆山羊中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，以权利要求6所述山羊KRTAP13-1基因定点敲除的细胞为核移植供体细胞，离体的山羊卵母细胞为核移植受体细胞，通过核移植技术获得山羊克隆胚胎，然后将克隆胚胎通过胚胎移植技术移入山羊子宫内妊娠，获得KRTAP13-1基因定点敲除的山羊。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于内蒙古大学，未经内蒙古大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910495313.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
