[发明专利]一种基因分型或基因多态性检测的实验质控品的制备方法

说明书

一种基因分型或基因多态性检测的实验质控品的制备方法。本发明是一种基因分型或基因多态性检测的质控品的制备方法，涉及临床检验学、病理学和生物技术领域，一种基因分型或基因多态性检测的质控品，血库/血站制备滤膜收集物为原料经稀释后，采用荧光定量PCR或一代测序定型后分装，经过性能评价并储存于‑20℃至‑80℃(‑80℃效果更好)作为日常基因分型或基因多态性检测的质控品。本发明方法得到的质控品可以长期保存于低温条件下，可以用于基因分型或基因多态性检测的EQA和IQC，其制备来源样本充足，可覆盖常见基因型，一次制备至少可满足半年的用量，制作方法简便，易于保存，该方法为首次。

技术领域

一种基因分型或基因多态性检测的实验质控品的制备方法，本发明属于临床检验学、病理学和生物技术领域，具体涉及自制质控品的样本来源、样本收集、样本分装保存、稳定性和均匀性评价。

背景技术

基因分型或基因多态性检测，是临床药物用药安全监测和用药指导常用的实验室检测，按照卫计委《医疗机构临床实验室管理办法》(卫医发〔2006〕73号)、《医疗机构临床基因扩增管理办法》卫办医政发〔2010〕194号，以及ISO15189医学实验室认可在临床基因扩增检验领域的要求，日常医学检验项目在检测当中需要有外部质控品，但在日常检测工作中基因分型或基因多态性检测无法获得准确可靠的商用质控品。

在“国家药品监督管理局”数据检索查询，没有找到有国家授权资质的可以用于基因分型或基因多态性检测的商业化质控品。

在“中国知网”，以“质控品制备”为关键词，未检索到基因分型或基因多态性检测的质控品，仅检索到1篇《CYP3A5基因检测质控品制备及其应用研究》，作者为鲍芸、肖艳群、蒋玲丽、王雪亮、杨依绡、王华梁，临床检验杂志，2019年02期，该项目为通过用基因工程技术体外构建含CYP3A5*3(rs776746)位点上、下游序列的重组质粒，筛选CYP3A5*3AA和GG基因型分别作为野生型和突变型样品，两者等比例混合后作为杂合突变型样品，与本发明有本质区别。

在“万方数据库”，以“质控品制备”为关键词，检索了2010年以来的期刊论文、学位论文和专利数据库，未检索到基因分型或基因多态性检测的质控品制备发明专利。

在“万方数据库”，以“质控品制备”为关键词，可检索到的分子诊断检测领域的自制质控品，如《自制室内质控血浆在罗氏COBAS AmpliPrep/TaqMan 48超敏PCR检测系统的应用》作者蔡瑜、戎国栋、徐婷，等，中华实验和临床感染病杂志(电子版)2014，(5)；《EB病毒核酸检测质控品制备及其应用》作者王雪亮刘芬，等，检验医学，2015，30(11)；以上两项研究都是用于病毒检测质控的。

在“万方数据库”，以“质控品制备”为关键词，可检索到《一种无创产前检测胎儿21、18和13 三体综合征的阳性质控品及其制备方法》(公开/公告号：CN104531842A)，发明/设计人：李明、高旭年、杨学习，等；《一种片段化DNA的制备方法》(公开/公告号：CN109022419A)发明/设计人：应康、张维、许波、储青青。前者用于新生儿遗传病的产前筛查，后者制备的cfDNA的片段化DNA，两者都是采用的DNA 片段，与天然标本还是有很大区别的。

在“万方数据库”，以“质控品制备”为关键词，检索到李金明为首位作者的有3项发明专利，分别是

《一种检测肿瘤相关基因突变的质控物及其制备方法》(申请/专利号：CN201610214877.X)、《一种肺癌检测质控品及其制备方法》(公开/公告号：CN105441541A)、《一种乳腺癌检测质控品及其制备方法》(公开/ 公告号：CN104569397A)；李金明的发明无论利用合成含肿瘤相关基因突变DNA片段与基因组DNA混合制作质控品，还是用培养的乳腺癌细胞系制作成石蜡包埋的标本切片，质控品制备都是来源于病理组织或细胞。