[发明专利]一种普鲁兰酶突变体有效
申请号: | 201910501002.1 | 申请日: | 2019-06-11 |
公开(公告)号: | CN110184258B | 公开(公告)日: | 2020-11-06 |
发明(设计)人: | 段绪果;栾舒越;张心怡;沈镇炎;朱秋雨;赵林果;史洁莹 | 申请(专利权)人: | 南京林业大学 |
主分类号: | C12N9/44 | 分类号: | C12N9/44;C12N15/56;C12P19/22;C12P19/20;C12P19/16;C12P19/14 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 林娟 |
地址: | 210000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 普鲁兰酶 突变体 | ||
1.一种普鲁兰酶突变体,其特征在于,所述普鲁兰酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的普鲁兰酶的第513位由苯丙氨酸突变成酪氨酸得到的;
或者,所述普鲁兰酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的普鲁兰酶的第507位至第513位由依次为赖氨酸、亮氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、脯氨酸、谷氨酰胺以及苯丙氨酸的氨基酸序列突变成依次为天冬氨酸、脯氨酸、苏氨酸、谷氨酰胺以及酪氨酸的氨基酸序列得到的;
或者,所述普鲁兰酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的普鲁兰酶的第507位至第511位由依次为赖氨酸、亮氨酸、天冬酰胺、谷氨酸以及脯氨酸的氨基酸序列突变成依次为天冬氨酸、脯氨酸以及苏氨酸的氨基酸序列得到的。
2.编码权利要求1所述普鲁兰酶突变体的基因。
3.携带权利要求2所述基因的重组质粒。
4.如权利要求3所述的重组质粒,其特征在于,所述重组质粒的载体为pET载体、pGEX载体、pPICZ载体、pAN载体或pUB载体。
5.携带权利要求2所述基因或权利要求3或4所述重组质粒的宿主细胞。
6.如权利要求5所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为细菌或真菌。
7.权利要求1所述普鲁兰酶突变体的制备方法,其特征在于,将权利要求5或6所述的宿主细胞接种至发酵培养基中进行发酵,发酵结束后,收集发酵获得的发酵液进行离心,离心结束后,从离心获得的发酵上清液中分离权利要求1所述的普鲁兰酶突变体。
8.权利要求1所述普鲁兰酶突变体或权利要求2所述基因或权利要求3或4所述重组质粒或权利要求5或6所述宿主细胞或权利要求7所述制备方法在水解淀粉方面的应用。
9.一种水解淀粉的方法,其特征在于,将权利要求1所述普鲁兰酶突变体或权利要求5或6所述宿主细胞与其他淀粉酶同时加入淀粉中进行酶解;所述其他淀粉酶为糖化酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶和/或淀粉葡萄糖苷酶。
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