[发明专利]一种普鲁兰酶突变体有效

专利信息
申请号: 201910501002.1 申请日: 2019-06-11
公开(公告)号: CN110184258B 公开(公告)日: 2020-11-06
发明(设计)人: 段绪果;栾舒越;张心怡;沈镇炎;朱秋雨;赵林果;史洁莹 申请(专利权)人: 南京林业大学
主分类号: C12N9/44 分类号: C12N9/44;C12N15/56;C12P19/22;C12P19/20;C12P19/16;C12P19/14
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 林娟
地址: 210000 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 普鲁兰酶 突变体
【权利要求书】:

1.一种普鲁兰酶突变体,其特征在于,所述普鲁兰酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的普鲁兰酶的第513位由苯丙氨酸突变成酪氨酸得到的;

或者,所述普鲁兰酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的普鲁兰酶的第507位至第513位由依次为赖氨酸、亮氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、脯氨酸、谷氨酰胺以及苯丙氨酸的氨基酸序列突变成依次为天冬氨酸、脯氨酸、苏氨酸、谷氨酰胺以及酪氨酸的氨基酸序列得到的;

或者,所述普鲁兰酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的普鲁兰酶的第507位至第511位由依次为赖氨酸、亮氨酸、天冬酰胺、谷氨酸以及脯氨酸的氨基酸序列突变成依次为天冬氨酸、脯氨酸以及苏氨酸的氨基酸序列得到的。

2.编码权利要求1所述普鲁兰酶突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的重组质粒。

4.如权利要求3所述的重组质粒,其特征在于,所述重组质粒的载体为pET载体、pGEX载体、pPICZ载体、pAN载体或pUB载体。

5.携带权利要求2所述基因或权利要求3或4所述重组质粒的宿主细胞。

6.如权利要求5所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为细菌或真菌。

7.权利要求1所述普鲁兰酶突变体的制备方法,其特征在于,将权利要求5或6所述的宿主细胞接种至发酵培养基中进行发酵,发酵结束后,收集发酵获得的发酵液进行离心,离心结束后,从离心获得的发酵上清液中分离权利要求1所述的普鲁兰酶突变体。

8.权利要求1所述普鲁兰酶突变体或权利要求2所述基因或权利要求3或4所述重组质粒或权利要求5或6所述宿主细胞或权利要求7所述制备方法在水解淀粉方面的应用。

9.一种水解淀粉的方法,其特征在于,将权利要求1所述普鲁兰酶突变体或权利要求5或6所述宿主细胞与其他淀粉酶同时加入淀粉中进行酶解;所述其他淀粉酶为糖化酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶和/或淀粉葡萄糖苷酶。

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