[发明专利]单核细胞增生李斯特菌血清型4h多重PCR检测试剂盒

权利要求书

1.检测基因lmo1210以及基因xysn_1693的试剂在制备单核细胞增生李斯特菌血清型4h多重PCR检测试剂盒中的用途，检测基因lmo1210的试剂为lmo1210基因检测引物，所述基因lmo1210检测引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO .3所示的正向引物和核苷酸序列如SEQID NO .4所示的反向引物；检测基因xysn_1693的试剂为xysn_1693基因检测引物，所述基因xysn_1693检测引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO .6所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO .7所示的反向引物。

2.一种单核细胞增生李斯特菌血清型4h多重PCR检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中包括基因lmo1210检测引物以及基因xysn_1693检测引物；所述基因lmo1210检测引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO .3所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO .4所示的反向引物；所述基因xysn_1693检测引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO .6所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO .7所示的反向引物。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中还包含ddH₂O、dNTP、PCRbuffer、rTaq酶、样品基因组DNA提取试剂中的一种或多种。

4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中还含有阳性对照和/或阴性对照。

5.如权利要求2~4任意一项所述的试剂盒的检测方法，所述检测方法为非疾病诊断目的的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)提取样品基因组DNA；

(2)加样：将样品基因组DNA、阳性对照和/或阴性对照分别加入装有PCR反应体系的PCR管中，获得对应的样品反应管、阳性反应管和/或阴性反应管，所述PCR反应体系中含有前述基因lmo1210以及基因xysn_1693检测引物；

(3)PCR反应：反应管置于PCR仪上，设置循环参数，进行PCR反应；

(4)PCR反应结束后，分析结果。

6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于：步骤（3）中PCR反应条件为：95℃预变性5 min；95℃变性30 s、55℃退火30 s、72℃延伸30 s，35个循环；72℃终止10 min。

7.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于：步骤（4）中结果分析判定方法如下：同时扩增出211 bp和429 bp条带时，判定为血清型4h的单核细胞增生李斯特菌阳性；仅扩增出211 bp条带时，判定为其他血清型单核细胞增生李斯特菌阳性；无条带则为单核细胞增生李斯特菌阴性。

8.如权利要求2~4任意一项所述的单核细胞增生李斯特菌血清型4h多重PCR检测试剂盒在制备基因lmo1210以及基因xysn_1693检测产品中的用途。