[发明专利]一种光热响应的杂化纳米疫苗及其制备方法

说明书

本发明公开了一种光热响应的杂化纳米疫苗及其制备方法，所述杂化纳米疫苗包括磁性介孔硅、吲哚菁绿及金黄色葡萄球菌外膜囊泡（OMV）。本发明以细菌外膜囊泡作为疫苗及递送载体；同时激光照射可使吲哚菁绿产生热量促进溶酶体逃逸；溶酶体破裂产生的活性氧（ROS）可进一步激活蛋白酶体，以促进抗原的加工处理；最终获得协同效应以提高疫苗免疫效果。本发明属于药物制剂领域与生物医药技术领域。本发明的纳米疫苗制备过程简单、可控，经济成本低，重复性好，可对耐药性金黄色葡萄球菌感染进行有效预防，在临床上具有很高的应用价值。

技术领域

本发明涉及药物制剂领域与生物医药技术领域，具体来说涉及一种光热响应的杂化纳米疫苗及其制备方法。

背景技术

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)广泛分布于自然环境中，是临床上常见的病原菌之一。由摄入葡萄球菌肠毒素而引起的食物中毒是世界上最常见的食源性疾病之一，严重危害公共卫生安全。由于抗生素的滥用，金黄色葡萄球菌菌株出现不同程度的耐药现象，多重耐药菌株也大大增多，耐药金黄色葡萄球菌已经成为目前现有的抗生素难以抑制的病原菌之一。耐药金黄色葡萄球菌的产生给相关治疗带来了巨大挑战，因此急需一种新的抗菌策略来抑制金黄色葡萄球菌引起的感染。

外膜囊泡(Outer membrane vesicles，OMV)是由革兰氏阴性菌和某些革兰氏阳性菌产生的具有生物学活性物质的囊泡状结构，大多数为球形，大小在20-250nm之间。外膜囊泡的组成包括外膜蛋白、磷脂、DNA以及在形成过程中被外膜包裹的周质成分等。由于外膜囊泡不能复制且含有大量的细菌抗原，并能有效激活免疫系统，所以被认为是极具潜力的疫苗候选物质。

光热效应可导致溶酶体膜流动性增加及膜破裂，促进纳米粒子的溶酶体逃逸。吲哚菁绿(indocyanine green，ICG)是一种用于临床的近红外成像试剂，遇可见光会分解并产热。因此介孔硅装载吲哚菁绿后，通过激光照射可产热，以促进溶酶体逃逸，从而促进交叉递呈、提高疫苗免疫效果。

发明内容

发明目的：为了解决现有技术存在的问题，本发明所要解决的技术问题是提供了一种光热响应的杂化纳米疫苗。

本发明还要解决的技术问题是提供了光热响应的杂化纳米疫苗的制备方法。

技术方案：为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为：一种光热响应的杂化纳米疫苗，所述杂化纳米疫苗包括磁性介孔硅、吲哚菁绿及金黄色葡萄球菌外膜囊泡。

其中，所述磁性介孔硅装载吲哚菁绿形成内核，所述金黄色葡萄球菌外膜囊泡包裹于内核表面。

其中，所述金黄色葡萄球菌包括但不仅限于S.aureus BW15，其它分泌外膜囊泡的细菌均适用。

其中，所述磁性介孔硅的粒径为50～100nm左右。

本发明内容还包括所述的光热响应的杂化纳米疫苗的制备方法，包括以下步骤：

1)OMV的制备：选取金黄色葡萄球菌培养至对数期，菌液离心取上清，超滤管浓缩后进行超离，沉淀即OMV；

2)ICG/MSN的制备：配置ICG溶液，加入MSN，室温避光搅拌，磁力架分离ICG/MSN；

3)OMV/ICG/MSN的制备：取步骤1)中OMV与步骤2)中ICG/MSN混合，用挤出仪来回挤出，磁力架分离包裹好的OMV/ICG/MSN。

其中，所述步骤1)的金黄色葡萄球菌包括但不仅限于S.aureus BW15，其它分泌外膜囊泡的细菌均适用。

其中，所述步骤2)中的ICG溶液与MSN的质量比为1∶100～1∶200。

其中，所述步骤3)中的OMV与ICG/MSN质量比为1.5∶1～2∶1。